Ki67PCNA和乳腺分叶状肿瘤相关性及临床意义.docVIP

Ki67PCNA和乳腺分叶状肿瘤相关性及临床意义 　　【摘要】目的：探讨Ki67、PCNA在乳腺分叶状肿瘤（PT）中的表达和意义。方法：采用免疫组织化学SP法检测66例乳腺分叶状肿瘤进行检测，比较良性、交界性和恶性PT中Ki67和PCNA表达的差异。结果：PCNA在不同组织级别的乳腺分叶肿瘤中表达指数有显著差异。Ki67蛋白表达在良恶性PT病变中有统计学意义（P0.05）。在良性PT中PCNA和Ki67表达率低，交界性、恶性PT表达率高，随着PT组织级别的增高，其表达率和表达强度增加，两指标呈正相关（r-O.6073，PO.001）。结论：PCNA和Ki67有可能作为判断PT恶性度的指标。用PCNA和Ki67来反映乳腺分叶状肿瘤增殖活性，辅助进行组织学分级，鉴别良恶交界性病变及估测预后，都有一定的使用价值。 　　【关键词】乳腺肿瘤；分叶状肿瘤；增殖细胞抗原；表皮生长因子；Ki67 　　【中图分类号】R730 【文献标识码】A 【文章编号】2095-6851（2014）04-0049-02 　　乳腺分叶状肿瘤（PT）是一种少见的纤维上皮性肿瘤，分别占乳腺原发性肿瘤的0.3%～1.0%，占纤维上皮性肿瘤的2.5%[1]。实验通过66例乳腺分叶状肿瘤间质细胞中PCNA和增殖细胞周期相关核抗原Ki67的表达情况，分析评价PCNA和Ki67与PT组织学分级以及两指标表达之间的相关性，探讨在PT分级诊断和临床诊断中的辅助生物学标记作用，希望能为PT的临床治疗提供一个新的思路。 　　1 材料与方法 　　1.1 研究对象：青岛大学医学院附属医院2000～2012年乳腺分叶状肿瘤66例，均为女性，年龄17～70岁，平均年龄40岁。肿瘤大小1.1～15.0 cm，平均5cm。经两位医师复查HE切片。根据WHO（2003）乳腺肿瘤组织学标准：肿瘤边缘有无浸润，间质细胞增生程度，细胞的异型性，核分裂象计数，有无坏死和出血.有无异源性的间质成分，对PT的分级进行综合性分析判断。66例PT中良性30例，交界性20例，恶性16例。 　　1.2 试剂及方法：鼠抗人PCNA和Ki67单克隆抗体、PV-8000试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。组织经10%福尔马林固定、石蜡包埋，4um连续切片，0.01M枸橼酸盐（pH=6.0）抗原修复液中微波修复15min，按试剂盒要求步骤进行操作。 　　1.3 结果判定：PCNA染色阳性表现为细胞核呈棕黄色或浅黄色，而胞浆不着色。不着色为阴性（-）；阳性细胞数50%为强阳性（+++）.着色强度仅为（-）者判为阴性病例，着色强度为（+）、（++）及（+++）者判为阳性病例。对于异质性明显的肿瘤，如果同一切片中同时存在（+）、（++）、（+++）的情况，以高级别评分。Ki67阳性表现为细胞核呈棕黄色着色而胞浆不着色.每张切片随机取10个阳性高倍视野，每个高倍视野计数100个癌细胞，根据阳性细胞占全部细胞的比例平均值将其分为：阳性细胞数50%为强阳性（+++）。 　　1.4 统计学分析：采用SPSS19.0统计软件包进行数据处理，采用x2检验Spearman等级相关分析，以P0.05作为有统计学意义的标准。 　　2 结果 　　2.1 良性、交界性和恶性PT中PCNA和Ki67的表达：由表1、表2可见，在良性、交界性及恶性PT级别增加的过程中，PCNA和Ki67阳性表达依次增高。PCNA在良性PT中的阳性表达率为33.3%（5/15），均为弱阳性或中度阳性表达；交界性PI表达阳性率为80.0%（6/8）；恶性PI表达率为100%.其中62.5%（5/8）为强阳性表达（图1一A，B，C）。交界性PT和恶性PT中PCNA阳性表达率均明显高于良性PT （X12=7.788，X22=16.534，P0.05）。Ki67蛋白的阳性表达率在良性肿组为13.3%（2/15），均为弱阳性表达；交界性PT为60.O%（6/10）；恶性阻为100%（8/8），其中50/O%（4/8）为强阳性表达（图1一D，E，F）。交界性PT和恶性PT中PCNA表达均明显高于良性PT（X12=8.088，X22=17.710，P0.05）。 　　2.2 PCNA和Ki67在PT中表达的相关性分析等级相关分析显示，两指标表达之间有显著正相关性，r=-0.6073，P0.001。见表3。 　　3 讨论 　　现在认为PT的组织病理学表现和生物学行为不完全相关。单一的组织病理学特征在肿瘤的良恶性鉴别方面的价值相对局限[2]。因此近十几年来国内外学者把研究重点转向多个生物学标记联合应用方面。 　　增殖细胞核抗原（ProliferatingCellNuclearAntigen简称PCNA）由Miyachi等于1978年在 SLE（系统性红斑