多肽基荧光生物传感器的构建及其应用研究分析化学专业论文.docxVIP

目 录 HYPERLINK \l _bookmark0 摘要. 1 HYPERLINK \l _bookmark1 Abstract 3 HYPERLINK \l _bookmark2 第一章 绪论 5 1. 荧光生物传感器 HYPERLINK \l _bookmark3 5 1.1 荧光生物传感器简介5 1.2 荧光生物传感器的研究进展6 2. 多肽8 2.1 多肽的结构与特点 9 2.2 多肽的性质与应用 10 2.3 多肽在荧光传感器中的应用 12 3. 论文设想14 参考文献 16 第二章 基于激子能量转移的多肽-量子点共聚物无标记胰蛋白酶检测 20 1. 引言20 2. 实验部分21 3. 结果与讨论22 4. 结论31 参考文献31 第三章 基于多肽诱导量子点聚集行为的裸眼、多路蛋白酶活性检测34 1. 引言34 2. 实验部分36 3. 结果与讨论38 4. 结论49 参考文献49 第四章 多肽-石墨烯基荧光传感器的构建及对胶原酶的检测 52 1. 引言52 2. 实验部分53 3. 结果与讨论55 4. 结论61 参考文献61 结论与展望64 发表文章及获奖情况66 致谢67 PAGE PAGE 10 摘要 本论文以多肽功能化纳米材料基荧光生物传感器的研究为背景， 通过设计、合成特定序列的肽链，考察了多肽与纳米材料的作用机理， 并应用于蛋白酶的分析检测。具体内容如下： 首先，综述了荧光生物传感器及多肽的特点和研究进展。归纳总 结了目前利用多肽与生物分子结合的作用机理，重点分析了多肽在蛋 白酶荧光传感器方面的应用进展，阐述了论文内容并提出工作设想。 其次，以巯基丙酸为修饰剂制备水溶性 CdTe 量子点，对其光谱 性质和形貌等进行了表征。首次设计了一条新颖而独特的肽链，使其 既可以与水溶性半导体纳米晶体结合，诱导其聚集，又可以被胰蛋白 酶水解。构建了一个简单、无标记、灵敏的检测胰蛋白酶的荧光 turn-on 传感器，而且可实现在紫外灯下的裸眼检测。其最低检测限可达 20ng/mL。 再次，通过对上述工作的总结，我们发现在实际应用中，多路复 用和高通量测定蛋白酶活性的简单方法对于快速医疗诊断更具有实 际价值。于是利用 FAM(5-羧基荧光素)标记肽诱导的量子点聚集机 制，构建了一个 FAM-肽-QDs 基多路复用荧光传感器来用荧光仪或裸 眼监测胰蛋白酶和胶原酶的活性。该传感器实现了以单个肽底物检测 两种酶，更加扩展了多路复用蛋白酶传感器的应用效率。方法简单易 行，对于胰蛋白酶和胶原酶检测的线性范围分别为 0.75μg/mL 到 15μg/mL 和 5μg/mL 到 50μg/mL，而最低检测限可分别达到 0.2μg/mL 和 1μg/mL。 最后，利用石墨烯大的比表面积，好的水溶性和生物相容性的特 点，构建了多肽-氧化石墨烯基新型荧光生物传感器用于高灵敏的检 测胶原酶活性。该方法检测胶原酶的线性范围可从 0.5μg/mL 跨至 40μg/mL，接近两个数量级，而最低检测限可达 0.2μg/mL。 关键词：荧光生物传感器、多肽、半导体纳米晶、蛋白酶 Abstract In this thesis, under the research background of the polypeptide functionalized nanomaterials-based fluorescence biosensor, the peptide chains with specific sequence were designed and synthesized, and the interaction mechanism between the polypeptides and the nanomaterials was explored, which had been successfully applied for the detection of protease activity. The contents are as follows: First of all, the characteristics and research progress of fluorescent biosensor and polypeptides were reviewed. The reported interaction mechanism between polypeptides and biological molecules was summarized and the application progress of the polypeptides in protease fluorescent sensor