肠部分切除吻合术对豚鼠小肠 cajal间质细胞的影响-人体解剖与组织胚胎学专业论文.docxVIP

贵阳 贵阳医学院 2013 届硕士研究生论文 PAGE PAGE 10 肠部分切除吻合术对豚鼠小肠 cajal 间质细胞的影响 摘要：目的：通过制作豚鼠十二指肠部分切除吻合术模型，结合免疫组化、免疫 荧光、肌电活动记录等方法观察 cajal 间质细胞在修复过程中的数量、分布及生 长情况，了解 cajal 间质细胞的突起能否通过生长延长重新形成细胞网络，探讨 cajal 间质细胞的自主节律性；同时探讨药物甲磺酸伊马替尼是否对 cajal 间质 细胞的生长和肌电活动产生影响，肠蠕动功能是否能够得到恢复，最终为防治和 治疗胃肠运动功能障碍性疾病提供实验依据。方法：1、动物分组：选用 90 只健 康雄性清洁级豚鼠，体重 200～250g。动物随机分成两组、A 组正常对照组（10 只）。B 组为手术组（80 只）分为术后自由喂养组和术后给药两组，每组 40 只。 2、模型建立与取材：给予戊巴比妥钠腹腔注射进行动物麻醉实施十二指肠部分 切除吻合术，术后各组均按 7、15、30、50 天分别处死后，取吻合部位肠管。3、 组织病理检查：麻醉后取出吻合部位经 HE 及免疫组化和免疫荧光染色后，光镜 下观察记录。4、肌电活动检测：麻醉后取出吻合部位，将电极插入肌层，通过 BL-420 系统检测肠道肌电活动情况。结果：1.术后动态观察吻合处生长情况： 肉眼观察未见粘连、感染、梗阻、出血及瘘口，吻合口头端和尾端肠管末见狭窄 或膨胀。纵行切片经 HE 染色光镜下观察，正常对照组可见正常的十二指肠纵行 结构，各层组织清晰。手术组十二指肠吻合部位可见吻合口肠腔面为粘膜上皮覆 盖，浆膜面为结缔组织所覆盖，吻合部位也可见较多的结缔组织，内含大量胶原 纤维、成纤维细胞及毛细血管，但未见明显的炎性细胞侵润，肠壁平滑肌层结构 紊乱。2.术后 cajal 间质细胞的再生情况?免疫组化 K1T 阳性细胞数量（个/400 倍镜下）：正常对照组（16.1±0.93）；术后 7 天组（1.32±0.21）；给药 7 天 组（1.3±0.17）；术后 15 天组（2.71±0.29）；给药 15 天组（1.34±0.11）； 术后 30 天组（6.99±0.98）；给药 30 天组（6.14±0.82）；术后 50 天组（11.29 ±1.42）；给药 50 天组（8.06±1.14）；?免疫荧光 K1T 阳性细胞数量（个/400 倍镜下）：正常对照组 （9.49±0.66）；术后 7 天组（ 2.28±0.64）；给药 7 天组（1.41±0.22）；术后 15 天组（2.41±0.62）；给药 15 天组（2.23±0.5）； 术后 30 天组（6.19±0.44）；给药 30 天组（5.56±0.6）；术后 50 天组（8.31 ±0.77）；给药 50 天组（7.72±0.72）。3.肌电活动记录：正常对照组 波幅（31.47 ±0.84）μV 频率（17.52±0.55）次/min；术后 7 天组波幅（25.48±0.74）μV 频率（13.66±0.62）次/min；给药 7 天组波幅（22.97±0.62）μV 频率（12.37 ±1.24）次/min；术后 15 天组波幅（30.89±0.78）μV 频率（15.25±0.97）次 /min；给药 15 天组波幅（29.23±0.66）μV 频率（14.02±0.62）次/min；术后 30 天组波幅（31.63±0.56）μV 频率（16.66±0.95）次/min；给药 30 天组波 幅（31.06±0.85）μV 频率（17.26±0.62）次/min；术后 50 天组波幅（31.06 ±0.9）μV 频率 17.25±0.62 次/min；给药 50 天组波幅（31.28±0.58）μV 频 率（16.92±0.48）次/min。结论:豚鼠行小肠部分切除吻合术后，能够减慢肠道 的自发节律性活动。但随着吻合口的愈合，发现 Cajal 间质细胞具有再生的能力， 能够修复受损细胞网络的延续性和完整性，肠道自发节律性活动可以得到恢复。 而且药物甲磺酸伊马替尼与抑制 Cajal 间质细胞的再生速度和数量有关，并能够 影响肠道自发节律性活动。 关键词： Cajal 间质细胞；c-kit 受体；肌电活动；豚鼠; 甲磺酸依马替尼； 肠部分切除吻合术 前 言 西班牙神经解剖学家 Santiago Ramon 在 1893 年利用甲基蓝和镀银然染色在 豚鼠和家兔小肠发现了一种细胞，称为 Cajal 间质细胞(interstitial cells of Cajal， ICCs)。100 多年来，学者们通过对胃肠壁内 ICCs 的形态、超微结构以及生理功 能等一系列的研究，初步明确 ICCs 是一种特殊的间质细胞，细胞以网