二甲双胍对大鼠肾小球系膜细胞氧化应激的影响-内科学(内分泌与代谢病)专业论文.docxVIP

目录 中英文缩略词表…………………………………………………………1 中文摘要…………………………………………………………………3 英文摘要…………………………………………………………………7 正文…………………………………………………………………… 8 引言…………………………………………………………………… 9 材料与方法…………………………………………………………… 10 结果…………………………………………………………………… 16 讨论…………………………………………………………………… 18 结论…………………………………………………………………… 22 参考文献……………………………………………………………… 23 附录…………………………………………………………………… 26 致谢…………………………………………………………………… 27 综述…………………………………………………………………… 28 中英文及缩写对照表 中文全称 英文全称 英文缩写 糖基化终末产物 血管紧张素 II 过氧化氢酶 advanced glycosylation Angiotensin II Catalase end products AGEs AngⅡ CAT 糖尿病肾病 Diabetic nephropathy DN 终末期肾功能衰竭 Endstage renal disease ESRD 磷酸甘油醛脱氢酶 Glyceraldehyde phosphate dehydrogenase GAPDH 高糖 High glucose HG 大鼠肾小球系膜细胞 Mesangia cells MCs 丙二醛 Malondialdehydel MDA 活性氧 Reactive oxygen species ROS 逆转录聚合酶链反应 Reverse transcriptase polymerase RT-RCR 超氧化物歧化酶 chain reaction superoxide dismutase SOD 硫氧还蛋白 Thioredoxin Trx 解偶联蛋白 Uncoupling proteins UCP 二甲双胍对大鼠肾小球系膜细胞氧化应激的影响 摘要 目的 观察高糖条件培养的大鼠肾小球系膜细胞(Mesangial Cells, MCs)氧化应 激水平以及二甲双胍（Metformin，Met）对其氧化应激的影响，探讨二甲双胍保 护肾脏机制。 方法 将大鼠GMCs置于体外培养，分组如下： ① 正常对照(NG)组：DMEM液（Glu 5.6mmol/L） ② 高糖(HG)组：DMEM液（Glu 25mmol/L） ③ 二甲双胍1组（Met 1组）：HG+Met（0.5mmol/L） ④ 二甲双胍2组（Met 2组）：HG+met（1.0mmol/L） ⑤ 二甲双胍3组（Met 3组）：HG+met（2.0mmol/L） 不同浓度二甲双胍先干预 24h，每组细胞培养 48h 后收集细胞和上清培养液，各个 检测指标均设 6 个 重 复 组 。 MCs 内 还 原 型 烟 酰 胺 腺 嘌 呤 二 核 苷 酸 磷 酸 ( Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate, NADPH )氧化酶亚基 p22phox 和 p47phox mRNA 表 达 采 用 逆 转 录 聚 合 酶 链 反 应 ( Reverse transcription polymerase chain reaction, RT-RCR )方法测定，上清液中脂质过氧化物丙二醛 （MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性采用比色法测定。 结果 （1）每组 MCs 上清液中 MDA 含量的比较 与 NC 组相比，经高糖刺激后的 MCs 上清液中 MDA 含量明显升高（p0.05）；与 HG 组比较， 各二甲双胍组 MCs 上清液 MDA 含量均减少（P0.05）。 （2）每组 MCs 上清液中 SOD 活性的比较 与 NC 组相比，经高糖刺激后的 MCs 上清液中 SOD 活性明显下降（p0.05）；与 HG 组比较， 各二甲双胍组上清液 SOD 活性均有不同程度升高，但各二甲双胍组 SOD 活性仍低于 NC 组。 （3）每组 MCs P22phox 表达的比较 与 NC 组相比，经高糖刺激后的 MCs P22phox 表达显著增多（p0.05）；与 HG 组 比较， 各二甲双胍组上清液 P22phox 表达减少，但各二甲双胍组 P22phox 表达高 于 NC 组。 （4）每组 MCs P47phox 表达的比较 与 NC 组相比，经高糖刺激后的 MCs P47phox 表达显著增多（p0.05）；与 HG 组 比较， 各二甲双胍组上