二硫化碳对雄性大鼠睾丸生殖细胞线粒体相关途径细胞凋亡的影响-劳动卫生与环境卫生专业论文.docxVIP

目 录 英文缩写 1 摘 要 3 Abstract 4 前 言 6 HYPERLINK \l _TOC_250000 第一部分 CS2 亚慢性染毒对雄性大鼠睾丸生殖细胞线粒体途径细胞凋亡的影响 9 1 材料和方法 9 2 结果 20 3 讨论 31 第二部分 CS2 亚慢性染毒对大鼠睾丸生殖细胞中线粒体呼吸酶复合物表达水平的影响 35 1 材料与方法 35 2 结果 37 3 讨论 39 结 论 41 参考文献 42 创新点 41 后续工作 42 综 述 47 在读硕士研究生期间参与的教学、科研和论文发表情况 60 英文缩写 NO. 英文缩写 中文 1 △Ψ m 线粒体跨膜电位 2 ADP 二磷酸腺苷 3 AIF 凋亡诱导因子 4 AP 过硫酰胺 5 Apaf-1 凋亡酶激活因子-1 6 ATP 三磷酸腺苷 7 Caspase 半胱天冬酶 8 cDNA 互补脱氧核糖核酸 9 CS2 二硫化碳 10 Cyto C 细胞色素 C 11 DNA 脱氧核糖核酸 12 ELISA 酶联免疫吸附法 13 HRP 辣根过氧化物酶 14 MPT 线粒体通透性转换 15 MPTP 线粒体通透性转换孔 16 mRNA 信使核糖核酸 17 NO 一氧化氮 18 NOS 一氧化氮合酶 19 OD 光密度 20 PMSF 苯甲基磺酰氟 21 Procaspase 半胱天冬酶原 22 PVDF 聚偏二氟乙烯 23 qPCR 荧光实时定量聚合酶链反应 24 RNA 核糖核酸 25 ROS 氧化活性物 26 SDS 十二烷基硫酸钠 27 Smac 线粒体二级半胱天冬酶激活因子 28 UDG 尿嘧啶-脱氧核糖核酸糖基化 29 WB 蛋白免疫印迹分析 二硫化碳对雄性大鼠睾丸生殖细胞 线粒体相关途径细胞凋亡的影响 硕士研究生：黄晓彧 导 师：陈国元 教 授 摘 要 目的：探讨不同浓度 CS2 亚慢性染毒对大鼠睾丸生殖细胞线粒体途径细胞凋亡的影响。 方法：清洁级健康 SD 雄性大鼠 24 只，随机分为 4 组，CS2 染毒浓度分别为 0、50、250、 1250mg/m3，静式吸入染毒，每周 5 天，每天 2 小时，共 10 周。染毒结束后，断头处 死动物，提取睾丸生殖细胞中胞浆蛋白，WB 法检测 AIF、Cyto C、Bcl-2、Bax、 Procaspase-9/3 含量；提取总蛋白，分光光度法检测 Caspase-9/3 酶活性；提取线粒体蛋 白， ELISA 法检测 MPTP 及线粒体中呼吸酶复合物 I-V 的表达水平；提取总 RNA， 应用 qPCR 法检测 AIF、Cyto C、Bcl-2、Bax、Procaspase-9/3 等各基因相对表达水平。 结果：与对照组相比，各染毒组大鼠睾丸生殖细胞胞浆中 Cyto C 含量上升（P 0.05）； 在中浓度组中，Bax/Bcl-2 比值、Caspase-9/3 酶活性上升，Procaspase-9/3 蛋白的表达水 平下降（P 0.05）；在高浓度 CS2 作用下， Bax 和 AIF 蛋白的相对表达水平上升，而 Bcl-2 蛋白表达水平则下降（P 0.05）。 与对照组相比，各染毒组大鼠睾丸生殖细胞中 MPTP 水平有明显的下降（P 0.05）， 线粒体内呼吸酶复合物 I-V 表达水平上升（P 0.05）。 与对照组相比，各染毒组动物睾丸生殖细胞中 Caspase-9 及 Bax mRNA 表达水平 上升（P 0.05），Bax 与 Bcl-2 mRNA 表达水平之比亦升高（P 0.05）；在高浓度 CS2 作用下，睾丸生殖细胞中 Cyto C、Caspase-3 和 AIF mRNA 相对表达水平上升，而 Bcl-2 mRNA 表达水平则有明显下降（P 0.05）。 结论：CS2 染毒可影响雄性大鼠睾丸生殖细胞线粒体途径的细胞凋亡过程。 关键词：二硫化碳；睾丸生殖细胞；细胞凋亡；线粒体；呼吸酶复合物 Effect of Carbon Disulfide on Testicular Germ Cell Apoptosis Meditated by Mitochondrion Related Pathway in Male Rats Candidate: Xiaoyu Huang Supervisor: Prof. Guoyuan Chen Abstract Objective: To investigate the effect of mitochondrion on apoptosis medicated by carbon disulfide in testicular germ cell in male rats. Methods : Twent