促红细胞生成素对兔视网膜神经节细胞保护作用-眼科学专业论文.docxVIP

石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明 学位论文独创性声明 本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据 我所知，除文中已经注明引用的内容外 ，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的 研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表 示谢意。 研究生签名： 时间： 年 月 日 使用授权声明 本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文 并向国家主管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文用于赢利目 的的少量复制并允许论文进入学校图书馆被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据 进行检索。有权将学位论文的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规 定。 研究生签名： 时间： 年 月 日 导师签名： 时间： 年 月 日 前 言 青光眼是一种常见的不可逆性致盲眼病，其致盲率仅次于白内障，而位居第二位[1]。 以视神经凹陷性萎缩和视野缺损为特征。其发病机制尚未完全清楚[2]，目前公认的有两 种学说：一是机械学说：强调视神经纤维直接受压、轴浆流中断的重要性；二是缺血学 说：强调视神经供血不足，对眼压耐受性降低的重要性。一般认为青光眼视神经损害的 机制很可能为机械压迫和缺血的共同作用。无论是哪种机制作用的结果都是导致了视网 膜神经节细胞的凋亡，以及伴随而来的视功能进行性丧失。 促红细胞生成素(erythropoietin，EPO) EPO是一种糖蛋白激素,是组织氧合状态的一种主要决定因素,对机体供氧状况发挥 重要的调控作用。传统认为EPO是一种作用于骨髓造血细胞,促红系祖细胞增生、分化、 成熟的内分泌激素。人类EPO含有165个氨基酸，分子质量为34.4ku，其中60％是蛋白质 (单个多肽链)，40％为糖类，有3个N端糖链和1个O端糖链，并有2个双硫键连接。EPO及 其受体广泛分布于人类多种组织中，亦存在于胎儿脑组织的整个发育过程中，并在成人 脑中仍然存在。EPO通过促进红细胞生存、增殖及分化来调节红细胞生成。 近年来，大量的研究显示EPO及其受体(erythropoietin receptor，EPOR)在神经系 统上有功能表达，在体外培养及动物实验中都显示了显著地视神经保护功能。在眼科， 青光眼、视网膜脱离、视网膜色素变性等疾病的共同病理机制是视网膜神经节细胞 （retinal ganglion cell，RGC）、光感受器细胞等神经元的凋亡，最终导致视力的丧失， EPO为机体表达成分，而非合成药物，研究表明EPO可能成为一种新的神经保护剂[3-5]。有 研究表明当培养的神经元或者神经干细胞缺氧时加人超生理浓度的EPO(5u/mL)可以保 护神经元免受损伤[6]。对培养的海马及大脑皮层神经元预先给予生理浓度的重组EPO处理 8h或更久可以预防N-甲基-D-天冬氨酸为中介的谷氨酸导致的神经坏死[7]。 EPO对视网膜神经组织保护作用方面的研究较少，但结果都显示了EPO的神经保护作 用。在早期糖尿病大鼠模型中，使用外源性的EPO能改善早期糖尿病大鼠的视网膜EPO受 体的上调并延缓视网膜神经细胞的结构损伤[8]。我们既往的研究结果证明皮下注射EPO 可以缓解急性高眼压对兔眼视网膜电图的损害，保护视网膜的神经功能[5]。EPO可通过小 鼠的血视网膜屏障，对视网膜光损伤起到保护作用[9]。玻璃体腔内注射EPO也有助于防止 视网膜缺血再灌注后视网膜神经节细胞的凋亡[10]。 重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin，rHuEPO) 早年从再生障碍性贫血病人的尿中、胎肾细胞的培养液中可获得较多的 EPO。自本 世纪初发现促红细胞生成素（EPO）以来，现已提纯了人体的该类激素，并确认了其化 学结构。最近几年，应用重组 DNA 技术，已能大量生产促红细胞生成素，获得重组人促 红细胞生成素(recombinant human erythropoietin，rHuEPO)，使 EPO 得以在临床上广 泛应用，其在急性高眼压视网膜缺血再灌注损伤模型[11]和视神经切断损伤模型[12]中的神 经保护作用已被证实。 青光眼的研究过程中，如何建立理想的青光眼动物模型是前提性的工作。杨新光等 [13]将输液器内注满复方氯化钠液，输液器的一端连接血压计气囊，一端连接 4 号半针头 穿刺入大鼠前房内，这样制作的急性高眼压模型，对眼压的控制直观且精确，是一种非 常理想的制作急性高眼压模型方法。较为理想的慢性高眼压模型是通过激光产生的青光 眼动物模型[14]。国外的学者[15,16]多采用氩激光照射大鼠或恒河猴小梁网来诱导慢性高眼 压的产生。由于激光制作慢性高眼压模型的价格较贵，操作复杂，在国内应