出生前DEHP暴露对雌性子代大鼠生殖系统发育的影响-公共卫生与预防医学专业论文.docxVIP

学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取 得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志 对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定， 即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用 影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有 关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。 本论文属于 保密 ，在 年解密后适用本授权书。 不保密 。 （请在相对应的方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 导 师 签 名 ： 日期： 年 月 日 中文摘要 目的 探讨出生前暴露邻苯二甲酸二（2-乙基己）酯（DEHP）对子代雌性大鼠生 殖系统发育的影响及其作用机制。 方法 性成熟 SPF 级 Sprague-Dawley 大鼠，按雌雄 1：1 合笼交配。若受孕，从此 日起定为 G0，每日称量孕鼠体重并观察孕鼠饮食摄水情况。将获得的 40 只孕鼠 按体重随机分为溶剂对照组（玉米油）以及 2mg/kg、10mg/kg、50mg/kg 三个剂 量组，每组 10 只。孕鼠自 G14~G19 连续灌胃染毒，灌胃体积为 1ml/100g 体重。 F1 代子鼠出生后第一天定为 PND0，记录新生鼠体重、肛门生殖器距离（AGD）、 各窝产仔数和性别比以及是否存在死胎、畸胎情况。F1 代子鼠出生后第 21 天断 乳，断乳后雌雄分笼饲养，每周测量雌性大鼠体重。雌性子代大鼠分笼饲养后， 每日检查其阴道是否开口，以阴道开口日龄作为青春期开始的标志。雌性大鼠 阴道开口后，每日观察阴道脱落细胞形态学变化并记录雌鼠动情周期。F1 代雌 性大鼠饲养至 70 日龄左右，于动情间期称重、测量 AGD 后断头处死并取血分 装血清，称量子宫以及卵巢湿重并计算脏器系数。采用放射免疫法检测雌性大 鼠血清甾体激素睾酮（T）、雌二醇（E2）、孕酮（P）以及促性腺激素黄体生成 素（LH）水平。取卵巢组织提取 mRNA，实时荧光定量 PCR 检测大鼠卵巢组织 中 PPARγ、StAR、P450arom、P450scc、3β-HSD、17β-HSDI、17β-HSDII mRNA 表达水平。 结果 （1）各处理组间孕鼠饮水摄食情况未见异常，体重增量与孕期无统计学差 异(P0.05)。未见死胎、畸胎。各窝产仔数以及性别比无统计学差异(P0.05)。 （2）各处理组间 F1 代雌性大鼠出生时体重存在统计学差异(P0.01)，与对照组 相比，10mg/kg、50mg/kg 剂量组雌性大鼠出生时体重降低；各剂量组间两两比 较，2mg/kg 剂量组分别与 10mg/kg 以及 50mg/kg 剂量组间有统计学差异(P0.05)， 2mg/kg 剂量组雌性大鼠出生时体重高于 10mg/kg 以及 50mg/kg 剂量组。各处理 组间 F1 代雌性大鼠出生时 AGD 无统计学差异(P0.05)。（3）各处理组间 F1 代雌性大鼠出生后至哺乳期体重存在统计学差异(P0.001)；各处理组间 F1 代雌 性大鼠青春期前体重存在统计学差异(P0.05)，与对照组相比，2mg/kg 剂量组雌 I 性大鼠体重升高(P0.05)，50mg/kg 剂量组降低(P0.05)；各处理组间 F1 代雌性 大鼠青春期至性成熟期体重存在统计学差异(P0.05)，与对照组相比，50mg/kg 剂量组雌性大鼠体重降低(P0.05)；各处理组间 F1 代雌性大鼠性成熟期后体重 没有统计学差异(P0.05)。（4）各处理组间 F1 代雌性大鼠阴道开口时间无统计 学差异(P0.05)。各处理组间 F1 代雌性大鼠动情周期异常率有统计学差异 (P0.05)，与对照组相比，50mg/kg 剂量组长期停留在动情间期的雌性大鼠数量 增多。（5）各处理组间 F1 代雌性大鼠子宫、卵巢脏器系数无统计学差异(P0.05)。 （6）各处理组间 F1 代雌性大鼠血清孕酮水平存在统计学差异(P0.05)，与对照 组比较，10mg/kg 剂量组 F1 代雌性大鼠血清孕酮水平升高(P0.05)；各剂量组间 比较，10mg/kg 剂量组 F1 代雌性大鼠血清孕酮水平大于 2mg/kg 剂量组(P0.05)。 各处理组间 F1 代雌性大鼠血清雌二醇水平无统计学差异(P0.05)。各处理组间 F1 代雌性大鼠血清睾酮水平存在统计学差异(P0.05)，与对照组比较，10mg/kg 剂量组 F1 代雌性大鼠血清睾酮水平升高(P0.05)；各