噪声致听力损伤豚鼠穴位注射神经生长因子疗效剖析.docVIP

噪声致听力损伤豚鼠穴位注射神经生长因子疗效剖析 　　[摘要] 目的 探讨神经生长因子（NGF）对噪声所致听力损伤豚鼠的修复作用。 方法 取健康雄性豚鼠48只随机分成4组，分别为对照组（正常组）、腹腔注射组、穴位注射组、模型组（听力损伤），除对照组以外，其余3组豚鼠均24 h放置在声压级100 dB（A）的白噪声中，共7 d，每组豚鼠均用畸变产物耳声发射（DPOAE）来判断其幅值、信噪比；然后通过注射NGF，观察其对各组豚鼠听觉通路上GJB2基因、SLC26A4基因表达的影响。 结果 穴位注射组DPOAE幅值测试结果和性噪比测试结果，提示除f0为0.25 Hz处P 0.05外，其余频区P 0.01；穴位注射组GJB2基因、SLC26A4基因表达分别为8.45和6.65（OD/dL），显著低于其他观察组（P 0.05）。 结论 神经生长因子穴位注射不失为一种治疗噪声性听力损伤安全有效的新方法。 　　[关键词] 神经生长因子；畸变产物耳声发射；听力损伤；疗效分析 　　[中图分类号] R-33 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）03（c）-0019-03 　　噪声能够导致听力损伤，耳蜗毛细胞对噪声损害最敏感，也是噪声损害是主要因素[1]。但是目前国内外仍缺乏真正根治的方法，最近有报道外源性神经生长因子（NGF）能够减轻噪声对其损害，从而对噪声性听力损伤具有较明显的保护作用[2]。本文通过设计对比实验，依据对照原则，在穴位处对有听力损伤的豚鼠注射神经生长因子，观察其NGF对听力损伤的修复作用，由畸变产物耳声发射（DPOAE）针对听力变化予以表示。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　体重在250～350 g（购自广州中医药大学动物中心）的健康雄性豚鼠48只，随机分为4组，每组12只（24只耳），经系统检测，耳廓反射正常。将其分为对照组（正常组）、腹腔注射组、穴位注射组、模型组（听力损伤），除对照组以外，剩下3组豚鼠均24小时放置在声压级100dB（A）的白噪声中，共7 d；在暴露前、暴露后、治疗后3个时间区域内，用畸变产物耳声发射观察每组豚鼠于噪声中三个阶段的幅值和信噪比。 　　1.2 听力损伤模型制作 　　白噪声经由纯音听力计发出，在声场扬声器作用下，向动物箱内发出暴露声压级100 dB（A）的噪声，声场不均匀度为±1 dB（A）。每天24 h，连续7 d。 　　1.3 治疗方法 　　（1）模型组：每天1次腹腔注射1 mL0.9%NaCl溶液；（2）腹腔注射组：按3000 U/kg冻干粉针NGF加1 mL 0.9% NaCl溶液稀释腹腔注射，每天1次；（3）穴位注射组：按3 000 U/kg冻干粉针NGF（厦门北大之路生产“恩经复”，卫药试字加1 mL注射用水稀释，分别以剂量0.5 mL双耳隔日交替注射翳风、完骨二穴；（4）对照组：无治疗动作。治疗时间均为28 d。 　　1.3.1 测试仪器 仪器：丹麦Madsen Capella型耳声发射仪；检测环境：环境噪声≤20dB（A）的声屏蔽室，上海康德听力技术有限公司生产。 　　1.3.2 DPOAE测试 测试内容为DP-gram幅值，叠加平均次数为200次，确认标准为高于本底噪声6 dBSPL，f0为0.75～8.0 KHz， f2/f1=1.220，L1=70 dB SPL，L2=60 dB SPL。测试前，在无菌条件下用苯妥英钠杀菌后，校准探头，去除外耳道内耵聍，经适宜耳塞后，将探头放入外耳道内密封，测1 000～8 000 Hz七个频谱。判断标准：有两个频率引出的DPOAE波形的重复性65%为正常。 　　1.4 统计学方法 　　用SPSS 11.5统计软件作数据处理，所有数据以均值±标准差表示，各组数据采用方差分析进行比较，P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 4组信噪比测试结果 　　4组DPOAE信噪比测试结果提示说明各组DPOAE信噪比测试结果均差异有统计学意义，模型组DPOAE信噪比测值明显降低，穴位注射组仅次于对照组，对照组最好。见表1。 　　2.2 4组幅值测试结果 　　对照组、模型组、腹腔注射组、穴位注射组DPOAE幅值测试结果提示除f0为0.25 Hz处P 0.05外，其余频区P 0.01，说明各组DPOAE幅值测试结果差异有高度统计学意义，同样的，穴位注射组改善最明显，腹腔注射组和穴位注射组听力有一定程度的改善，模型组听力效果最差。见表2。 　　2.3 穴位注射神经生长因子对各组豚鼠的耳蜗听觉通路上GJB2基因、SLC26A4基因表达的影响结果 　　GJB2基因、SLC26A4基因在听力损伤下充分表达，注射过NGF的两组豚鼠耳蜗