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龙胆对肝保护作用分析 　　摘要:通过不同毒物引起的肝损伤来研究关龙胆地上部分的保肝作用。选用D半乳糖胺、硫代乙酰胺、四氯化碳等3个肝损伤毒物造肝损伤模型,通过不同机制引起的肝损伤来研究关龙胆地上部分的保肝作用。关龙胆地上部分有一定的保肝作用,可降低各种肝损伤模型的ALT,AST,AKP等。关龙胆地上部分也有一定的药用价值,用全草取代地下部分入药有一定的可行性。 　　关键词:关龙胆;保肝作用;分析 　　中图分类号:R194文献标识码:A文章编号:1007-9599 (2010) 01-0000-02 　　 　　龙胆为常用中药,《中国药典》2000版收载为龙胆科植物三花龙胆、龙胆、三花龙胆或坚龙胆的干燥根及根茎,具有清热燥湿、泻肝胆火的功效,主治湿热黄疸、阴肿阴痒、带下、强中、湿疹瘙痒、目赤等症。三花龙胆又名东北龙胆,是“关龙胆”的主流,质量优良。一直以来中医以龙胆入药,只取其根及根茎部分,而地上部分则被当作废料丢弃。龙胆常被用作保肝中药。实验证明龙胆配伍茵陈、栀子、郁金等中药有促进胆汁分泌与排泄及降低转氨酶作用。为了更合理有效地开发资源,充分发掘我国中医药宝库的潜在价值,我们对关龙胆的茎、叶、花、根中的龙胆苦苷和当药苦苷进行了较深入的研究。同时,对地上部分总提取物的保肝作用也进行了研究。筛选改善肝功能药物和对其活性进行评价需用动物模型。利用毒物、营养因素缺乏、手术方法、免疫方法以及病毒可以造成肝损伤。造成肝损伤的毒物包括四氯化碳、硫代乙酰胺、醋氨酚、D-半乳糖胺、乙硫氨酸、α-萘异硫氰酸酯(ANIE)、鬼笔碱(phalloidin)、α-鹅膏素(α-amanitin)、酒精、黄曲霉素等。本实验选用D-半乳糖胺、硫代乙酰胺、四氯化碳等3个肝损伤毒物造肝损伤模型,通过不同机制引起的肝损伤来研究龙胆地上部分的保肝作用。 　　 　　一、材料 　　 　　(一)动物昆明种小鼠,体重(20.0±2.0)g,雌雄各半,哈尔滨市兽医研究所,动物质量合格证号:黑XCX 　　(二)试剂四氯化碳(CCl4),哈尔滨市新达化工厂产品(分析纯),批号000718;硫代乙酰胺(TAA),天津市科密欧化学试剂开发中心(分析纯),批D-半乳糖胺(GlanN):北京化工厂,批号870522;联苯双酯,德州德药制药有限公司,批号040410;甲醇,天津市科密欧化学试剂开发中心(分析纯),批谷丙转氨酶(ALT)试剂盒、谷草转氨酶(AST)试剂盒、碱性磷酸酶(AKP)试剂盒,南京建成生物工程研究所,批 　　(三)药材关龙胆,采自哈尔滨市蒋化龙胆种植基地,经哈尔滨商业大学中药鉴定教研室沈志滨副教授鉴定为关龙胆。 　　 　　二、方法 　　 　　取关龙胆根浸膏0.90g,加蒸馏水配成0.015g/ml溶液备用。给小鼠按20ml/kg灌胃给药(相当于生药5g/kg给药)。分别取关龙胆地上部分浸膏30.4,15.2,7.6g加蒸馏水配成0.5,0.25,0.125g/ml溶液备用。给小鼠按20ml/kg灌胃给药(分别相当于生药25,50,75g/kg给药)。 　　(一)龙胆地上部分对氨基半乳糖(GlanN)急性肝损伤的保护作用取(20±2)g健康小鼠,雌雄各半,随机分成正常组、模型组、关龙胆根组、不同剂量关龙胆地上部分组、联苯双酯组。除正常组、模型组小鼠每日灌胃生理盐水20ml/kg外,其它各组均按20ml/kg给药,1次/d,连续4d。于末次给药或生理盐水后0.5h,除正常组小鼠ip生理盐水20ml/kg外,其余6组小鼠分别按120mg/kg腹腔注射10%GlaN,18h后,眼眶取血,3000r/min离心10min,取血清测ALT,AST,AKP。 　　(二)龙胆地上部分对硫代乙酰胺(TAA)急性肝损伤的保护作用取(20±2)g健康小鼠,雌雄各半,随机分成正常组、模型组、关龙胆根组、不同剂量关龙胆地上部分组、联苯双酯组。除正常组、模型组小鼠每日灌胃生理盐水20 ml/kg外,其它各组均按20ml/kg给药,1次/d,连续4d。于末次给药或生理盐水后30min,除正常组小鼠腹腔注射生理盐水20ml/kg外,其余6组小鼠分别按50mg/kg腹腔注射TAA,18h后,眼眶取血,3000 r/min离心10min,取血清测ALT,AST,AKP。 　　(三)龙胆地上部分对CCl4急性肝损伤的保护作用取(20±2)g健康小鼠,雌雄各半,随机分成正常组、模型组、关龙胆根组、不同剂量关龙胆地上部分组、联苯双酯组。除正常组、模型组小鼠每日灌胃生理盐水20ml/kg外,其它各组均按20ml/kg给药,1次/d,连续4d。于末次给药或生理盐水后30min,除正常组小鼠腹腔注射生理