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单核细胞趋化蛋白-1对人脐静脉血管平滑肌细胞增殖的影响与金雀异黄素的干预作用
遵义医学院 硕士研究生论文
材料与方法
1材料
1．1主要试剂
改良Eagle培养基(DMEM) 购于Gibico公司
胎牛血清 购于华美生物工程公司
胰蛋白酶 为上海生物工程有限公司产品
青霉素、链霉素、庆大霉素 为华北制药厂产品
o【．actin免疫组织化学检测试剂盒 为Gene公司产品
金雀异黄素(genistein) 购于Sigma公司
hMCP．1、PDGF 购于晶美生物工程公司
巯氰酸胍(Research 购于SERVA公司
grade)
巯基乙醇 购于AMRESCO公司
s．s饱和酚 购于华美生物工程公司
MOPS．Rnasin 购于华美生物工程公司
ladder，DEPC(焦碳酸二乙酯) 购于华美生物工程公司
100bp
溴乙锭，溴酚兰 购于华美生物工程公司
琼脂糖 购于华美生物工程公司
MTT 购于华美生物工程公司
PI 为Sigma公司产品
RT-PCR试剂盒 为Promega公司产品
其余试剂 均为国产分析纯
生物工程公司合成。引物的碱基序列及扩增片段长度，见下表l。
表1 PCR引物及所扩增的eDNA的长度
usedforPCR andsizes eDNA
Table1 Primers ofspecific
amplification
Gene sizeoop)
Primer’(57—3’)Product
单核细胞趋化蛋白I对人脐静脉血管平滑肌细胞增殖的影响及垒雀异黄素的干预作用
遵义医学院 硕士研究生论文
GAPDHF-TCACCATCTTCCAGGAGCG
572
R-CTGCTrCACCACCl’r℃TTGA
c．10s F-GAGATTGCCAACCTGCTGAA
R-AGACGAAGGAAGACGTGt蛆
F：indicates R：indicatesreverse
forward；
1．2主要仪器 ．
C02孵箱 美国SHELL公司生产
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