tlr2mab和tlr4mab对dss诱导的小鼠急性期溃疡性结肠炎干预作用的研究内科学消化专业论文.docxVIP

复旦大学硕士论文TLR2mAb和TLR4mAb对DSS诱导的小鼠急性期溃疡性 复旦大学硕士论文 TLR2mAb和TLR4mAb对DSS诱导的小鼠急性期溃疡性 结肠炎干预作用的研究 中文摘要 目的探讨TLR2单克隆抗体(Tol l l ike receptor 2 monoant ibody，TLR2mAb) 和TLR4单克隆抗体(Toll like receptor 4 monoantibody，TLR4mAb)对葡聚糖 硫酸钠(dextran sulfate sodium，DSS)诱导的小鼠急性期溃疡性结肠炎 (ulcerative colitis，UC)的干预作用及其可能机制。 方法50只雄性BALB／cd、鼠分为A～E组：对照组(A组)、UC模型组(B组)及TLR2mAb 干预组(C组)、TLR4mAb干预组(D组)、TLR2mAb和TLR4mAb联合干预组(E组)。A组 小鼠饮用蒸馏水7天；B-E组小鼠仅饮用5％DSS水溶液7天以产生急性期溃疡性结肠 炎模型。于造模第1、3、5、7天进行干预，C、D、E干预组小鼠分别给予 TLR2mAb(10 u g)、TLR4mAb(10 u g)、TLR2mAb(10 IJ g)+TLR4mAb(10 p g)腹腔内注 射，A、B组给予腹腔内注射生理盐水，以观察TLR2mAb和TLR4mAb的干预作用。观 察指标包括疾病活动指数(disease activity index，DAI)、结肠组织病理学评 分(histopathological score，HS)。造模及干预7天后处死小鼠，采用 Realtime-PCR法检测各组结肠黏膜TLR2、TLR4、IFN—Y、IL一4及IL—17的mRNA表 达，Western-Blot法检测各组肠粘膜磷酸化p38 Q MAPK、c-jun、c-fos、磷酸化 IKK蛋白表达，EMSA法检澳I]NF-K B的活性变化。 结果 第一部分TLR2mAb和TLR4mAb对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠急性期溃疡性结肠炎 症状及病理改变的影响： 造模结束时，模型组小鼠产生典型的腹泻、血便、体重减轻等溃疡性结肠 炎表现。对照组、模型组、TLR2mAb干预组、TLR4mAb干预组、TLR2mAb和TLR4mAb 联合干预组的DAl分别为0．50±0．707、9．70±2．406、6．75±3．495、7．75±3．919、 5．70±3．498。模型组DAI明显高于对照组(PO．01)；TLR2mAb和TLR4mAb联合干 预组DAI明显低于模型组(PO．05)，且明显高于对照组(PO．01)；TLR2mAb 干预组、TLR4mAb干预组DAI与模型组比较无统计学意义(P0．05)。 2／67 复旦大学硕士论文对照组、模型组、TLR2mAb干预组、TLR4mAb干预组、TLR2mAb和TLR4mAb 复旦大学硕士论文 对照组、模型组、TLR2mAb干预组、TLR4mAb干预组、TLR2mAb和TLR4mAb 联合干预组的HS分别为6．40±3．273、16．50±2．991、13．25±3．576、14．50± 3．625、9．50±3．308。模型组HS明显高于对照组(PO．01)；TLR2mAb和TLR4mAb 联合干预组HS明显低于模型组(P0．01)和TLR4mAb干预组(PO．05)，与对照 组无统计学意义(P0．05)；TLR2mAb干预组、TLR4mAb干预组HS与模型组比较 无统计学意义(PO．05)。 第二部分TLR2mAb和TLR4mAb对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠急性期溃疡性结肠炎 肠黏膜细胞因子的影响： 对照组、模型组、TLR2mAb干预组、TLR4mAb干预组、TLR2mAb和TLR4mAb联 合干预组小鼠肠黏膜TLR2mRNA表达量如下：0．26±0．397、1．96±1．558、0．64 ±1．030、0．39±0．594、0．42±0．461。模型组TLR2mRNA表达明显高于对照组 (P0．01)；TLR2mAb干预组、TLR4mAb干预组、TLR2mAb和TLR4mAb联合干预组 TLR2mRNA表达明显低于模型组(PO．05)，与对照组无统计学意义(P0．05)。 对照组、模型组、TLR2mAb干预组、TLR4mAb干预组、TLR2mAb和TLR4mAb联 合干预组小鼠肠黏膜TLR4mRNA表达量如下：0．52±0．414、1．16±0．568、0．45 ±0．346、0．51±0．374、0．44±0．335。模型组TLR4mRNA表达明显高于对照组 (PO．01)；TLR2mAb干预组、TLR4mAb干预组、TLR2mAb和TLR4mAb联合干预组 TLR4mRNA表达明显低于模型组(PO．01，PO．05，eo．01)，