药物的含量测定方法与验证.ppt

三、色谱分析法 （一）高效液相色谱法（HPLC） 1.概述 HPLC：液体作流动相，高压输液，高效固定相，高灵敏度检测器。 特点：HPLC 有机物80%（GC，有机物20%） 分类：LLC 分配，离子交换色谱 LSC 吸附，离子对色谱 化学键合固定相：极性（正相键合色谱）；非极性（反相键合色谱）ODS（十八烷基硅烷键合相） 三、色谱分析法 （一）高效液相色谱法（HPLC） 2.基本原理 塔板理论；Van Deemter 速率理论 色谱峰：峰高、峰面积→定量 峰位（保留值）→定性 区域宽度（峰宽）→衡量柱效 三、色谱分析法 （一）高效液相色谱法（HPLC） 例题：在气相色谱法中，与含量成正比的是色谱峰的： A.保留体积 B.保留时间 C.相对保留值 D.峰高 E.峰面积 答案：DE 三、色谱分析法 （一）高效液相色谱法（HPLC） 3.高效液相色谱仪 1）贮液瓶 2）高压输液泵 3）色谱柱（分离系统） 4）检测器（紫外检测器最为常用） 5）数据处理系统 三、色谱分析法 （一）高效液相色谱法（HPLC） 4.一般要求 固定相：硅胶；化学键合硅胶；ODS C18、C8、氨基、氰基； 流动相：甲醇；水；乙腈…（不同配比） 进样量：数ml； 室温：柱温； 检测器：紫外； 色谱图：20min； 系统适用性试验； 三、色谱分析法 （一）高效液相色谱法（HPLC） 5.系统适应性试验 四个指标 理论板数 n 分离度 R 重复性（精密度） RSD 2.0% 拖尾因子： T应在0.95-1.05 三、色谱分析法 （一）高效液相色谱法（HPLC） 柱效（最小理论塔板数） n＝5.54（tR/ Wh/2）2 tR（保留时间，min）， Wh/2（半峰宽，cm） 一般大于1000 三、色谱分析法 （一）高效液相色谱法（HPLC） 分离度 R＝2（tR2－tR1）/（W1＋W2） R≥1.5 三、色谱分析法 （一）高效液相色谱法（HPLC） 例题：测得两色谱峰的保留时间tR1＝6.5min，tR2＝8.3min，峰宽W1＝1.0min，W2＝1.4min，则两峰分离度R为： A.0.22 B.1.2 C.2.5 D.0.75 E.1.5 答案：E 三、色谱分析法 例题：HPLC法与GC法用于药物复方制剂的分析时，其系统适用性试验系指 A.测定拖尾因子 B.测定回收率 C.测定保留体积 D.测定分离度 E.测定柱的理论板数 答案：ADE 第五节 分析方法的验证 一、分析方法验证的内容 （一）准确度 该分析方法所得测定结果与真实值或参考值接近程度。一般用回收率表示。 回收率 =（测定量）/加入量×100% 第五节 分析方法的验证 （二）精密度 在规定的测试条件下，同一个均匀样品，经多次测定结果之间的接近程度。 表示方法 1. 偏差(d) d = 测得值-平均值=Xi-X 2. 标准偏差（SD） SD=[(∑Xi – X)2/(n-1)]1/2 3. 相对标准差(RSD)也称变异系数(CV) RSD=SD/X ×100% 第五节 分析方法的验证 重复性、中间精密度及重现性 1.重复性：在相同条件下，由一个分析人员测定所得结果的精密度。 2.中间精密度：在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果的精密度。 3.重现性：在不同实验室由不同分析人员测定结果的精密度。 第四章 药物的含量测定方法与验证 概述 药物定量分析是指准确测定药品有效成分或指示性成分的含量，是评价药品质量、判断药物优劣的重要手段 化学分析法：重量分析，滴定分析 仪器分析法：专属性高（分离能力强） 验证内容：八个方面 重量分析法 以质量为测量值的分析方法。称取一定重量的供试品，用适当的方法将被测组分与试样中其它组分分离，根据被测组分和供试品的重量以计算组分的含量的百分数的定量方法。 重量分析法 分类： 挥发法、萃取法、沉淀法 优点：准确度高 0.1%～0.2% （称量误差小） 缺点：繁、长、低含量的测定误差较大。若有其它方法可以应用，避免用重量法。 药典应用： 药品的水分测定；药品中水中不溶物；炽灼残 渣；灰分测定。 第一节 定量分析方法的分类与特点 一、容量分析法（滴定分析法） 将已知浓度的滴定液由滴定管滴加到被测药物的溶液中，至滴定液与被测药物反应完全（通过适当方法指示），然后根据滴定液的浓度和被消耗的体积，按化学计量关系计算出被测药物的含量 简便，准确，快速，耐用性高 专属性差（适用于主成分含量较高的试样分析。如化学原料药的含量测定） 一、容量分析法（滴定分析法） 按药典规定，精密标定的滴定液（如盐酸及其 浓度）正确表示为 A.盐酸