碱性成纤维细胞生长因子与胶原对组织工程软骨体外构建的影响-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

旧 届 硕 卜学 位 论 文 碱 性 成 纤 维 细 胞 生 长 因 了 与胶 原 对 组 织 工 程 软 骨 体 外 构 建 的影 响 摘 要 碱 性 成 纤 维 细 胞 生 长 因 子 与 胶 原 对 组 织 工 程 软 骨 体 外 构 建 的 影 响 硕 士 研 究 生 专 业 导 师 吴 凤 麟 生 物 化 学 与 分 子 生 物 学 宇 丽 副 教 授 中 文 摘 要 目 的 ① 在 单 层 培 养 系 统 中评 价 碱 性 成 纤 维 细 胞 生 长 因 子 对 兔 生 长 板 软 骨 细 胞 增 殖 和 分 化 的 作 用 并 筛 选 其 用 于 体 外 软 骨 组 织 成 团 培 养 的 最 佳 浓 度 ② 以 成 团 培 养 印 为 培 养 系 统 以兔 生 长 板 软 骨 细 胞 为 种 子 细 胞 探 讨 与 基 质 胶 原 单 独 及 联 合 应 用 对 体 外 软 骨 组 织 构 建 的 影 响 探 索 构 建 组 织 工 程 软 骨 的 最 佳 条 件 方 法 ① 分 离 并 单 层 培 养 兔 生 长 板 软 骨 细 胞 添 加 不 同 浓 度 的 ② 采 用 染 色 法 检 测 细 胞 增 殖 倍 数 甲 苯 胺 蓝 染 色 观 察 软 骨 细 胞 外 基 质 酸 性 粘 多 糖 的 分 泌 经 脯 氨 酸 法 和 阿 新 蓝 法 测 定 基 质 产 量 酶 动 力 学 方 法 测 定 碱 性 磷 酸 酶 活 性 ③ 离 心 后 三 维 成 团 培 养 兔 生 长 板 软 骨 细 胞 并 根 据 第 一 部 分 实验 结 果 添 加 适 量 的 和 胶 原 ④ 染 色 观 察 新 生 软 骨 组 织 形 态 免 疫 组 化 检 测 型 和 型 胶 原 表 达 染 色 检 测 新 生 软 骨 组 织 中 含 量 甲 苯 胺 蓝 染 色 观 察 软 骨 细 胞 外 基 质 酸 性 粘 多 糖 的 分 泌 轻 脯 氨 酸 法 与 阿 新 蓝 法 测 定 软 骨 细 胞 外 基 质 中胶 原 与 蛋 白 多 糖 的 含 量 结 果 在 单 层 培 养 体 系 中 ① 经 历 多 次 传 代 后 软 骨 细 胞 发 生 了 去 分 化 由 多 角 形 届 硕 卜学 位 论 文 碱 性 成 纤 维 细 胞 生 长因 了 与胶 原 对 组 织 工 程 软 骨 体 外 构 建 的 影 响 摘 要 星 形 外 表 转 变 成 成 纤 维 细 胞 样 外 表 ② 浓 度 在 一 留 范 围 内 可 以 促 进 软 骨 细 胞 增 殖 并 以 浓 度 为 岁 时 刺 激 效 果 最 为 显 著 当 浓 度 高 于 留 时 抑 制 了 软 骨 细 胞 的 胶 原 合 成 当 浓 度 高 于 留 时 软 骨 细 胞 的 碱 性 磷 酸 酶 活 性 被 抑 制 对 软 骨 细 胞 蛋 白 多 糖 合 成 无 显 著 影 响 在 三 维 成 团 培 养 体 系 中 ③ 软 骨 细 胞 在 体 外 形 成 了 软 骨 样 组 织 并 具 有 明 显 层 次 和 分 化 区 带 ④ 和 胶 原 可 以 显 著 刺 激 软 骨 细 胞 增 殖 胶 原 可 以 显 著 促 进 胶 原 与 蛋 白 多 糖 的 合 成 而 对 软 骨 细 胞 外 基 质 合 成 无 显 著 影 响 随 着 培 养 时 间 的 延 长 型 胶 原 的 表 达 将 呈 上 升 的 趋 势 型 胶 原 的 表 达 逐 渐 减 少 组 胶 原 组 型 胶 原 的 表 达 少 于 对 照 组 型 胶 原 的 表 达 则 高 于 对 照 组 胶 原 与 的 联 合 应 用 对 软 骨 细 胞 增 殖 胶 原 合 成 及 细 胞 表 型 维 持 有 协 同 刺 激 作 用 结 论 ① 三 维 的 成 团 培 养 可 以 有 效 的 维 持 软 骨 细 胞 表 型 促 进 基 质 合 成 有 利 于 体 外 软 骨 再 生 ② 可 有 效 刺 激 体 外 培 养 的 生 长 板 软 骨 细 胞 增 殖 在 浓 度 高 于 留 时 抑 制 体 外 培 养 的 生 长 板 软 骨 细 胞 的 分 化 ③ 胶 原 有 促 进 细 胞 增 殖 的 效 果 并 可 以 明 显 促 进 软 骨 细 胞 外 基 质 的 合 成 维 持 细 胞 表 型 ④ 胶 原 与 的 联 合 应 用 可 以 维 持 细 胞 的 分 化 表 型 进 一 步 促 进 成 软 骨 作 用 关 键 词 胶 原 软 骨 再 生 届 硕 卜学 位 论 文 碱 性 成 纤 维 细 胞 生 长眯 子 与胶 原 对 组