碱性成纤维细胞因子对皮肤干细胞神经分化影响的研究-皮肤病与性病学专业论文.docxVIP

8 8 and NSE. The epidermal stem cells can be differentiated into neuron depending on the cell’s concentration. Key words: Epidermal stem cells; Differentiation; neuron; nestin; bFGF 4 4 英文缩略词表 bFGF NSE K-SFM PBS ECM HRP DMEM K15 Ptk basic fibroblast growth factor neuron．specific enolase keratinocyte serum free medium Phosphate Buffered Saline extracellular matrix horseradish peroxidase Dulbecco’s Modified Eagle Medium keratin 15 protein tyrosine kinase 碱性成纤维细胞生长因子 神经元特异性烯醇化酶 角质形成细胞无血清培养基 磷酸盐缓冲液 细胞外基质 辣根过氧化物酶 达可贝尔改良培养基 角蛋白 15 酪氨酸蛋白激酶 STAT signal transducer and activator of transcription 信号转导分子和转录激动子 JAK GRb2 HSP PTBD janus kinase growth factor binding protein heat shock protein phosphotyrosine binding domain 蛋白酪氨酸蛋白激酶 募集结合蛋白 热休克蛋白 磷酸酪氨酸结合结构域 2 2 学位论文原创性声明和版权使用授权书 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究 工作所取得的真实成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本论文的研究做出重要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 作者签名（手写）： 导师签名（手写）： 年 月 日  年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借 阅。本人授权福建医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 （保密的学位论文在解密后适用本授权书） 作者签名（手写）： 导师签名（手写）： 年 月 日  年 月 日 PAGE PAGE 10 前 言 神经干细胞在神经系统病伤的细胞治疗中有广阔的应用前景。目前已知神经 干细胞的来源有：胚胎源神经干细胞、成年神经干细胞、成年骨髓间充质干细胞、 脐血干细胞，皮肤干细胞等。皮肤干细胞较其它组织具有容易获得、能在体外快 速增殖、无免疫排斥、长期存活以及无关伦理道德问题等优点，将成为治疗神经 系统疾病的良好的材料。 大量研究表明，在体外可诱导一些皮肤干细胞成为神经细胞，有些皮肤干细 胞本身就具有神经干细胞性质，它们在一定的条件下可以分化为神经元和神经胶 质细胞等。nestin是目前鉴定神经干细胞最常用的细胞特异性标志抗原，属于中 间丝蛋白家族，只在多潜能的神经外胚层细胞表达，随着神经上皮的分化成熟逐 渐消失。用免疫细胞化学染色能清楚显示nestin分布在神经干细胞的胞质中。大 量研究表明nestin阳性的皮肤干细胞可以分化为神经细胞。Yasuyuki等[1]发现在 毛囊隆突区的干细胞中，存在有nestin阳性、CD34阳性而K15阴性的细胞(提示这 些细胞可能是处于未分化后期)，它们可以在体外分化为神经元、星形胶质细胞、 少突胶质细胞、角质形成细胞、平滑肌细胞和黑素细胞。而且，将这些细胞移植 到裸鼠皮下组织后可以分化为神经元。还有Femandes等[2]，发现在成年鼠真皮的 SKP有着与神经嵴干细胞相似的多分化潜能，它们免疫细胞化学染色nestin阳性， 可分化为周围神经元和施万细胞。Sieber．Blum等[3]报道，在毛囊隆突部位与毛 母质间的毛囊外根鞘存在有nestin染色阳性的神经嵴干细胞，它们可分化为神经 元、平滑肌细胞、许旺细胞和黑素细胞。然而，目前对于nestin、 CD34阴性， β1、 K15阳性的表皮干细胞是否也能向神经类细胞分化鲜见报道。本实验通过 快速贴壁法培养出表皮干细胞，通过改变表皮干细胞的密度和的碱性成纤维细胞 因子的浓度，观察表皮干细胞形态和表面标记物的