降压中药鬼针草中总黄酮的分离纯化及质量标准的建立-药物化学专业论文.docxVIP

山鹾医科大学硕士学位论文摘要 山鹾医科大学硕士学位论文 摘要 本文对治疗高血压有效的鬼针草总黄酮的提取工艺、初步除杂工艺及精制工艺进行了 研究。得到一条合理的工艺流程，为鬼针草总黄酮的工业化生产奠定了基础；对鬼针草药 材与总黄酮部位进行了定性、定量研究，并初步建立了鬼针草药材与总黄酮部位的质量标 准。 本实验以提取液中总黄酮的量为指标，用单因素实验确定正交实验的因素和水平，然 后用正交设计法对影响提取效果的因素如乙醇浓度、乙醇用量、提取次数和提取时间进行 考察，优化提取工艺。得出总黄酮的最佳提取工艺为12倍量80％乙醇，连续提取3次，每 次1．0 h。 本实验对鬼针草总黄酮的初步除杂工艺进行了研究。对ZTC II型天然吸附澄清剂的添 加顺序、添加量、反应时间、反应温度和待澄清供试液浓度等单因素对澄清效果的影响进 行考察。得到澄清剂的作用条件为澄清剂添加量B组分为120 mg／100 m1；A组分为60 mg ／100 ml、反应时间为30 min、反应温度为40℃和待澄清供试液浓度为0．557 mg／ml。 对鬼针草总黄酮的精制工艺进行了研究。以鬼针草总黄酮的吸附率和解吸率为指标， 选择合适的大孔吸附树脂；以富集后总黄酮的纯度为指标，用正交设计法确定最佳纯化工 艺条件。实验证明D．101型大孔吸附树脂对鬼针草总黄酮具有较好的吸附和解吸效果，其 最佳工艺条件为：用浓度为4．378 mg／ml并且pH=6的药液在径高比为1：20的D．101型大 孔吸附树脂制成的柱子上以2 BV／h的速度进行吸附，使大孔吸附树脂的比吸附量达11．8 mg／g。然后分别用4 BV的水和20％的乙醇洗脱液洗脱，再用5 BV的70％的乙醇溶液以 同样的速度进行解吸。这样总黄酮的动态洗脱率达86．7％，干膏中总黄酮的纯度由4．0％ 提高到22．4％，提高了5．5倍。 对鬼针草总黄酮进行了进一步的精制。比较3种聚酰胺对鬼针草总黄酮的吸附率与解 吸率，并从上样药液pH值、上样浓度、最大吸附容量、洗脱溶剂的选择等方面进行了考 察。实验结果表明：60-80目聚酰胺对鬼针草总黄酮的吸附与解吸附较好，确定其最佳工 艺条件为：浓度为2．0 mg／ml并且pH=6的药液在60-80目的聚酰胺柱子进行吸附，使聚酰 胺的比吸附量达11 mg／g。先用纯化水洗脱除去极性较大杂质成分，洗至Molish反应(检测 还原性糖)为阴性后，然后用6 BV的20％的乙醇洗脱液洗脱；再用4 BV的30％的乙醇洗 脱液洗脱；最后分别用2 BV的50％和70％的乙醇洗脱液。收集30％，50％和70％的乙 醇洗脱液并分别浓缩制成干膏，测定富集后的总黄酮纯度。实验表明用聚酰胺进行进一步 精制的方法优于溶剂萃取法(乙醚、氯仿、乙酸乙酯)，有较高的转移率和较好的富集效 果。 本文建立鬼针草及其总黄酮部位的质量标准，在定性研究方面，采用理化鉴别和微乳 薄层对鬼针草药材和总黄酮部位进行鉴别研究。理化鉴别表明鬼针草的提取液中含有黄酮 类成分，微乳薄层法可检出鬼针草药材和总黄酮部位中的芦丁和金丝桃苷。定量研究方面， 应用Uv分光光度法建立鬼针草药材与总黄酮部位中总黄酮含量的测定方法：应用I-IPLC 坐塑璧型奎兰塑主兰丝!垒苎 法建立鬼针草总黄酮部位中芦丁含量的测定方法，以上含量测定方法经方法学考察符合有 关规定。 关键词：鬼针草，总黄酮，大孔吸附树脂，ZTC II型天然吸附澄清剂 Abstract In this paper,the process of extraction and purification on the total flavonoides from spanishneedles herb were studied．A rational technological process was goRen，which establish a foundation for the industrialization．The quantificational and qualitative quality control methods on spanishneedles and its total flavonoides fraction had been estabalished and could be used as quality standard． To get the optimized extraction method，the concentration of ethanol，ethanol quantity, times of extraction and extraction time were investigated by using orthogona