胶质瘤放射敏感性与ATM蛋白表达关系的实验研究-外科学·神经外科专业论文.docxVIP

平中科援大牵一l串‘拳晓 平中科援大牵一l串‘拳晓 博士研究生辱位论文 胶质瘤放射敏感性与ATM蛋白表达关系的实验研究 博士研究生 陶胜忠 导 师 薛德麟教授 华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科 中文摘要 第一部分 不同放射敏感性胶质瘤中ATll蛋白、NF—K B及EGFR的 表达及其相关性研究 【摘要】目的探讨ATM蛋白、NF—K B和EGFR在不同放射敏感性胶质瘤巾 的表达水平和相互关系及其与胶质瘤放射敏感性的相关关系。方法应用免疫组 织化学SABC法检测了ATM蛋白、NF-K B及EGFR在11例髓母细胞瘤，12例室管 膜瘤，17例少枝胶质细胞瘤，低级别(I～II级)及高级别星形细胞瘤(III～IV级， 其中11例多形性胶质母细胞瘤)各21例和5例正常脑组织中的表达。结果正 常脑组织中均未见阳性表达：不同组织类型的胶质瘤中三者均具有不同的阳性表 达率和平均光密度值，ATM蛋白、NF～K B和EGFR的阳性表达率依次为32 9％， 48 8％和51 2％；三者同时阳性和阴性表达者分别为25．6％、36．5％：hl、M蛋白在多 形性胶质母细胞瘤表达率最高，在髓母细胞瘤和低级别星形细胞瘤表达较低，髓 母细胞瘤中平均光密度值与其他各组均有显著性差异(pm 05)，在低及高级别 星形细胞瘤间平均光密度值有显著性差异(pm 053。NF-K B和EGFR表达率在 髓母细胞瘤、室管膜瘤、少枝胶质细胞瘤、低及高级别星形细胞瘤、多形性胶质 母细胞瘤中呈依次上升趋势。结论ATM蛋白与N卜K B及EGFR存在相关关系， 它们的表达水平与胶质瘤的不同放射敏感性具有相关性。 【关键词】放射敏感性； 胶质瘤； 免疫组织化学；ATM蛋白； 核因子～K B； 表皮生长因子受体 华中舛捷太季—痒‘幸晓 华中舛捷太季—痒‘幸晓 博士研究生季往论文 第。二部分 ATM蛋白表达及细胞增殖活性与星形细胞瘤放射 敏感性关系的实验研究 【摘要】目的探讨星形细胞瘤中ATM蛋白表达及细胞增殖活性与放射敏感 性的相关性，为临床治疗提供参考。方法采用流式细胞仪检测了22例星形细 胞瘤中ATM蛋白的表达，并用四唑盐比色法(MTT)检测原代培养星形细胞瘤以60c。 2Gy放射剂量照射后的存活分数(SF2)，以探讨ATM蛋白的表达量与星形细胞瘤 放射敏感性的相关性：同时观察了5例原代培养的多形性胶质母细胞瘤细胞的形 态学变化并绘制生长曲线，采用免疫细胞化学方法检测增殖细胞核抗原(PCNA) 的表达，以明确星形细胞瘤增殖活性与放射敏感性的相关关系。结果原代培养 的星形细胞瘤细胞形态多样；SF2平均值为0．417±0．176(0．162～0．735)，在胶 质母细胞瘤与星形细胞瘤II、Ⅲ级问存在明显差异(仄O．05)；ATM蛋白表达水平 随星形细胞瘤恶性程度的增高而增加，在高、低级别星形细胞瘤问差异有显著性 (po．05)；直线相关与回归分析显示：ATM蛋白表达水平与SF2呈显著正相关 (r=O．857，pO．05)：5例原代培养的多形性胶质母细胞瘤细胞生长曲线和增殖活 性各不相同，PCNA标记指数与SF2的相关系数r为0．628(少O．05)。结论ATM 蛋白的表达水平与星形细胞瘤放射敏感性密切相关，放射敏感性与PCNA指数之 间无明显相关性；星形细胞瘤中存在不同放射敏感性的细胞群，放射治疗应体现 个体化原则。 【关键词】星形细胞瘤：放射敏l莲桂；流式细胞仪；ATM{婚；存活分数： 生长曲线；增殖细胞核抗原：MTT 第三部分 多形性胶质母细胞瘤放射前后A疆蛋白的表达 及ATM／P13-K区基因突变的检测 【摘要】目的探讨多形性胶质母细胞瘤(GBM)细胞辐射前后ATM蛋自表达 量的变化及ATM／P13～K区基因突变的情况。方法采用流式细胞仪技术检测U251 毕中科蔓太孽Iml牟‘牵吨 毕中科蔓太孽Iml牟‘牵吨 博士研竞生季位论文 细胞系及5例原代培养的多形性胶质母细胞瘤细胞以2Gy射线剂量照射前后A1M 蛋向表达量的变化，以逆转录聚合酶链式反应(RT—PCR)技术和PCR产物直接测序 方法，对多形性胶质母细胞瘤细胞中ATM／P13一K区关键区域进行突变检测。结果 U251细胞系中”co照射前后ATM蛋白量均明显低予原代培养GBM的ATM蛋白量， U251和原代GBM细胞ATM蛋白表达量有显著差异(仄O．05)；U251细胞系及原代 培养GBM细胞”Co照射后的AT