胶原三螺旋重复蛋白1对黑素瘤细胞A375迁移的影响及与Wnt通路的相关性分析-皮肤病与性病学专业论文.docxVIP

目 录 1 英文缩略词表····································1 2 前言············································2 3 摘要 中文摘要·····································5 英文摘要·····································6 4 正文 材料和方法···································7 结果········································14 讨论········································20 参考文献····································23 5 综述···········································27 6 附录···········································38 7 致谢············································39 华 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE PAGE 1 英文缩略词表 缩写 英文全称 中文全称 MM Malignant melanoma 恶性黑素瘤 CTHRC1 Collagen triple helix repeat containing 1 胶原三螺旋重复蛋白 1 β-cat β-catenin β连环蛋白 TGF-β Transforming growth factor-beta 转化生长因子β 胶原三螺旋重复蛋白 1 对黑素瘤 A375 细胞迁移的影响及与 Wnt 通路的相关性研究 硕士研究生：孙兰 导 师 ：黄长征 教授 华中科技大学同济医学院附属协和医院皮肤科 前 言 恶性肿瘤的基本特征之一是具有向周围正常组织浸润和侵袭的能力，并能 穿过淋巴管和血管，在远隔部位继续生长，形成继发瘤或转移瘤，这是恶性肿 瘤导致患者死亡的主要原因。恶性黑素瘤（malignant melanoma，MM）是一种 高度恶性的肿瘤，多发生于皮肤，在癌症死亡病例中，MM 约占 1%，且发病率 有逐年升高的趋势【1】，外科手术治疗可以有效治愈早期黑素瘤，而发生广泛转 移的黑素瘤治疗较困难，预后较差，平均生存时间仅 6-8 个月【24】。探索新且有 效的治疗方法有赖于对 MM 侵袭转移机制的进一步认识和研究【2】。 胶原三螺旋重复蛋白 1（collagen triple helix repeat containing 1，CTHRC1） 最早是从大鼠的受损动脉中筛选出来的一种过表达基因，可以促进成纤维细胞 和平滑肌细胞的迁移并且抑制Ⅰ型胶原的合成【3】。CTHRC1 是一种分泌糖基化 蛋白，结构上包含一个类似存在于 C1q/肿瘤坏死因子α相关蛋白胶原位点的短 的胶原样基序【25】。在人和大鼠中，该基因的氨基酸序列具有 92%的同源性【2】。 在脊椎动物中 CTHRC1 具有极高的保守性【3】，与现已有的蛋白极少有同源性， 目前没有发现其它家族成员。研究发现 CTHRC1 在多种人类实体肿瘤中异常高 表达，包括乳腺癌、黑素瘤、直肠癌、结肠癌、肝癌、肺癌、宫颈癌等等，通 过下调 CTHRC1 的表达可以降低肿瘤细胞的迁移能力【2】，说明 CTHRC1 可能 参与了一些肿瘤的发生和发展，目前机制尚不明确。 恶性肿瘤的侵袭和转移是复杂、多步骤的的过程，这些步骤包括肿瘤细胞 浸润到原发肿瘤的周围组织，进入淋巴管或血管，到达新的器官进行生长和血 管生成【4】。其中一些信号通路发挥着重要作用，如 Wnt、JAK-STAT、TGF-β /Smad、MAPK、Notch 通路等。Wnt 信号传导通路具有传递生长刺激信号的作 用，与细胞的发育、分化密切相关，其异常激活可能导致肿瘤的发生。众多研 究显示 Wnt 信号通路至少有以下 3 个主要分支：①经典 Wnt 通路，该通路通过 β连环蛋白（β-catenin）在细胞核中积累而启动下游靶基因。②Wnt/Planer 细 胞极性（PCP）通路，通过配体与受体（Wnt 与 Fizzled）的结合，激活 RhonA、 Rac1 及他们的下游蛋白激酶 ROCK 等来调节肌动蛋白的聚合，改变细胞的形 态，提高细胞的活力。③Wnt/Ca＋通路，引起细胞内 Ca＋和 Ca＋敏感信号成分的 激活。 人类肿瘤如乳腺癌、食管癌、结直肠癌、恶性黑素瘤、子宫内膜癌、原发性 肝癌、甲状腺癌等均存在Wnt通路异常【5】。许多研究已经证明在肿瘤的发