酵母双杂交RRS系统中婴幼儿小肠组织全长cDNA文库的构建及筛选-儿科学(心血管内科)专业论文.docxVIP

重庆医科大学硕士研究生学位论文英汉缩略语名词对照 重庆医科大学硕士研究生学位论文 英汉缩略语名词对照 英文缩写 英文全称 中文全称 bp base pair 碱基对 cDNA complementary deoxynucleic acid 互补脱氧核糖核酸 DEPC diethylprocarbonate 焦炭酸二乙酯 ddw double di stillated water 双蒸水 DMSO dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 DNA deoxynucleic acid 脱氧核糖核酸 dNTP deoxy—ribonucleoside triphosphate 三磷酸脱氧核苷 EDTA ethylene diaminetetracetic acid 乙二胺四乙酸 GaJ galactose 半乳糖 Glu glucose 葡萄糖 kD blo Dalton 千道尔顿 Leu leucine 亮氨酸 Met methionine 蛋氨酸 mRNA messenger ribonucleic acid 信使核糖核酸 OD optical density 光密度 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PEG polyethylene glycol 聚乙二醇 lⅢA ribonucleic acid 核糖核酸 lⅢase ribonuclease 核糖核酸酶 巾m rounds per mintue 转数／分 RRS Ras Recruitment System Ras募集系统 RV Rotavirus 轮状病毒 SRS Sos Recruitment System Sos募集系统 Tris tris(hydroxymethyl)aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 Ura uracyl 尿嘧啶 YPD yeast extract glucose medium 酵母抽提物培养基 重庆医科大学研究生学位论文独创性声明 重庆医科大学 研究生学位论文独创性声明 本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果．据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他 人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构 的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确的说明并表示谢意。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任． 学位论文作者签名： 牛 学位论文版权使用授权书 本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学 位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学。本人保证毕业离校后，发表论 文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学．学校有权保留并向国家有关 部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学 位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保 存论文． 论文作者签名： 指导教师签名： 曰 重庆医科大学硕士研究生学位论文酵母双杂交RRS系统中婴幼儿小肠组织全长cDNA 重庆医科大学硕士研究生学位论文 酵母双杂交RRS系统中婴幼儿小肠组织全长cDNA 文库的构建及筛选1 摘 要 背景轮状病毒(rotavirus，RV)是导致全世界婴幼儿严重腹泻 病的常见病原之一，每年可导致大约50万患儿死亡。无论发达国家还 是发展中国家，RV的感染率和发病率都很高。 因此迫切需要开发有 效的疫苗和治疗策略来对抗病毒。而这些研究的基础又需要从根本上 认识病毒作用于宿主细胞的分子机制。 RV感染细胞的第一个关键步骤是病毒与被感染细胞表面的病毒 受体结合。由于RV受体在宿主细胞上数量较少、性质复杂以及技术方 法的局限性，其性质迄今不清。全长eDNA文库构建、测序和功能注释 是了解生物体结构和功能的一种重要方法之一，它有助于鉴定其基因 组序列中的外显子一内含子的边界，分析基因编码区和理解基因在转 录和翻译水平的功能，是分析人类基因表达图谱、功能和结构的重要资 源。文库筛选作为一种获取未知功能基因的手段，对于研究病毒作用 于人体的分子机制起着非常重要的作用。 酵母双杂交技术自创立以来已成为研究蛋白质之间相互作用的重 要方法之一。传统的酵母双杂交方法所研究的蛋白质问相互作用是在 国家自然科学基金资助项目 重庆医科大学硕士研究生学位论文细胞核内完成的，而近年来在此基础之上发展起来的酵母双杂交衍生 重庆医科大学硕士研究生学位论文 细胞核内完成的，而近年来在此基础之上发展起来的酵母双杂交衍生 系统一Ras募集系统(RRS)，能够将蛋白质的相互作用定位于细胞膜 上，更具备了灵敏度高、假阳性少等突出优点。RRS的应用