酵母双杂交法筛选与核基质蛋白MINT片段相互作用的分子-发育生物学专业论文.docxVIP

秉承学较严谨瓣学嚣与撬责豹耩学遴器，零穴声靖耩至交鹃论文是蓑拿A 秉承学较严谨瓣学嚣与撬责豹耩学遴器，零穴声靖耩至交鹃论文是蓑拿A 在导孵搓导下进行靛硒究工作及取得帕磺究成果。尽我炳知，踩7文中特别埋 以标注椰致谢的地方外，论文中不包含其他^已经发表或撰写过的研究成果， 奉毽含本大或稔夭琶牵请学位羲美德瓣潘嫠焉避豹壤莱。与嚣一霹王律瓣嚣泰 对本研究‘惩擞靛狂德贡献甥已在论文中作了甥臻鹃疆骥并表累了致谢。 申请学位论文与资料蓿有不窦之处，本人承担一切相关责任。 论文作者签餐：2习塑鱼 丑弼：兰竺!：￡：塑 本A完全了解第西军医大学肓关保护知识产袄的规耄，娜：研究生往校攻读 学餐期颡烫文I器蕤囊谖产较辇魏囊蘩翳军嚣太学。零A瀑淫挚鲨褰获蠢，发 表论文鲠爱用论文I作成果时暑餐单位伲然为第四军医大学。学校有权保留送 交论文的复娜件，允许论文渡查闻栅借闲；学校可以公布论文的全部或部分内 容(爨赛舞客髂羚)，霹强最舞鬈臻、 缓臻蓑荚戆菱澍芋段瀑存论文。 论文作者签箬：她～导糖签名 丑翘：键!立：尘：!。 第四军医大学硕士学位论文英文缩略词表 第四军医大学硕士学位论文 英文缩略词表 荚文臻篝 全 嚣 孛文名秣 3-AT 3．Amino Triazole 3一氨基唑 AD Activation domain 转黎活纯靖稳域 Ade Adenine 腺噪呤 Amp Ampicillin 氨苄青霉素 BD Binding domain DNA结合结构域 Blast Basic local aiignment search tool 局部相似性检索 bp Basepair 蕊。蕊对 cDNA Complementary deoxynucleic acid 互补DNA cfu Colony forming unit 集落影成孳弦 DMSO Dimethylsulfoxide 二甲基亚砜 DNA Deoxyribonucleic acid 脱氯核糖核酸 dNTP Deoxynucleotide triphosphate 脱氧三磷酸核苷 DO Dropout E．coli Escherichia coil 走嬲姆菌 His Histidine 组氨酸 KD Kilodolton 手遵零顿 LB Luria-bertani medium LB培养基 Leu Lencine 亮氯酸 OD opti捌density 光密度 ORF Open reading-frame 开放闷读框 pC廷Polymcrase chaln rcac垃on 聚合酶链反威 PEG Polyethylene 聚乙二醇 PMSF Phenylmethyl sutfony fluouride 苯警基磺蕺裁 第四军医大学硕士学位论文SD 第四军医大学硕士学位论文 SD Synthetic dropout Taq Thermos aquaticus 嗜热菌 却 Tryptophan 色氨酸 Ura Uracil 尿嘧啶 5-bromo-4··chloro·-3·indolyl- 5．溴-4．氯．3．吲哚． X-gal B-D·galactosidc 13-i)-半乳糖苷 SpDNA Sperm DNA 鲑鱼精DNA 2 第四军医大学硕士学位论文酵母双杂交法筛选与核基质蛋白MINT片段相互作用的分子 第四军医大学硕士学位论文 酵母双杂交法筛选与核基质蛋白MINT片段相互作用的分子 硕士研究生： 周鹏 导 师： 韩骅教授 第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室 西安710032 摘 要 MINT(Msx2．interacting nuclear target protein)是定位于细胞核基质中的 一种蛋白质，全长3576氨基酸残基，富含脯氨酸与丝氨酸，其转录物分布于 胚胎及成体的多种组织．MINT分子舍有3个RNA识别结构域和4个核定位 信号，是Spen家族的成员，对转录起负调控作用．(MINT基因剔除小鼠在其 胚胎第14．5之前即死亡，同时伴有多系统多脏器的结构异常，提示MINT在 发育过程中具有极为重要的功能．MINT与Msx2或RBP-J1c结合后对下游靶 基因的转录起抑制作用，但具体的功能和作用机制目前并不清楚．广≈ 为研究MINT在发育与信号转导途径中的地位与作用，我们对其进行了 酵母双杂交筛选．鉴于Mint基因较长，故将其分为6段分别构建诱饵质粒筛 选小鼠胚胎9天的cDNA文库与人淋巴结cDNA文库．本文所述是以MINT-F1 (第1．365氨基酸残基)、F3(第1015-1661氨基酸残基)，F4(第1662．2228 氨基酸残