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专业学位硕士学位论文金属离子对丙酮丁醇发酵的影响 专业学位硕士学位论文 金属离子对丙酮丁醇发酵的影响 The efkct of metaI ions on acetone．butan01．ethanoI fbrmentation 作者姓名： 付友思 工程领域： 生物工程 学 号：指导教师： 匿亟态副麴援 完成日期： 2015年5月 大连理工大学 Dalian University of Technology 万方数据 大连理工大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，足本人在导师的指导下进行研究 大连理工大学学位论文独创性声明 作者郑重声明：所呈交的学位论文，足本人在导师的指导下进行研究 工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经注明引用内容和致谢的地方外， 本论文不包含其他个人或集体己经发表的研究成果，也不包含其他己申请 学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献 均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。 若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。 学位论文题目： 缝毛寻文寸、奄西日i酿拔魄鹤喜{旺角 作者签名： 纣7坦、 日期：兰!!i年—上月—上王日 万方数据 丈连理工大学专业学位硕士学位论文摘 丈连理工大学专业学位硕士学位论文 摘 要 当今石油资源日渐枯竭，并且环境污染问题日益严重，因此开发石油替代物——生 物能源逐渐成为研究热点。生物_J|醇是第二代生物燃料，与乙醇相比，丁醇具有热值高、 腐蚀性低和可直接通过管道运输等优点，最为重要的是能够直接代替石油应用于现有汽 车发动机，然而传统的丁醇发酵存在着发酵终点残余糖浓度高、丁醇产量和产率低等问 题，严重制约了丁醇发酵产业的发展。 已有大量研究工作表明金属离子对丙酮r醇发酵具有重要的调控作用，为解决丁醇 发酵丁醇产量和产率低问题，采用响应面方法优化丙酮]‘醇发酵培养基金属离子组成。 实验结果表明，在添加0．0026∥I。ZnS04-7H20、4．04∥L CaC03和0．84 g／L MnS04·H20 条件下，摇瓶发酵丁醇产量达到l 3．93 g／L，相比未优化条件提高1 6．9％。 采用批次发酵技术研究发酵过程变化情况，优化条件发酵结果表明Zn2+、ca2+和 Mn2+对丙酮丁醇发酵具有协同调控作用，丁醇及总溶剂产量分别为14．97 g／L及24．50 g／L，相对未优化条件下发酵结果分别提高厂28．1％及27．7％，丁醇及总溶剂产率分别为 0．37 g／L／h与0．61 g／L／h，相对未优化条件下发酵结果分别提高了105．6％及103．3％，发 酵终点葡萄糖基本消耗殆尽，丙酮丁醇发酵性能得到大幅提升。研究发现Zn2上、Ca2+和 Mnn的协同调控作用可以促进丙酮丁醇发酵过程丁酸重吸收作用，显著降低发酵终点丁 酸浓度，由此在初始培养基和优化金属离子条件下添加丁酸进行研究，结果表明，当添 加1．9∥L丁酸时0D620达到3．66，相比不添加丁酸条件提高14．3％，丁醇及总溶剂产量 分别达15．12∥L和24．86 g／L，与不添加丁酸条件相比略有提高。Zn2+、Ca2+和Mn2+的 协同调控作用有效提高菌体细胞对丁酸的重吸收能力，能够在较多丁酸添加条件下，重 吸收更多有机酸。 进一步对优化条件下丁丙酮丁醇发酵过程中13种关键胞内代谢物进行提取和定量 分析，结果表明，zn2+、Ca2+和Mn2+的协同作用能够增强丙酮丁醇发酵糖酵解过程，提 高菌体吸收利用底物葡萄糖能力，碳代谢通量显著增加；提高丁酰辅酶A合成途径关键 酶活性，丁酰辅酶A浓度显著提高，从而使得代谢流更多的流向丁醇合成途径：改善细 胞内能量和还原力状态，为溶剂生产提高良好细胞内环境。 本论文研究了金属离子对丙酮丁醇发酵过程及关键胞内代谢物的影响，在优化的金 属离子添加条件下，丁醇发酵性能得到提升，这为丁醇发酵法高效生产丁醇及总溶剂提 供了参考。 关键词：丁醇发酵；丙酮丁醇梭菌；金属离子；胞内代谢物；协同效应 万方数据 金属离子对丙酮r‘醇发酵的影响Effbct 金属离子对丙酮r‘醇发酵的影响 Effbct of metal ions on acetone．butan01．ethanoI fermentation Abstract Nowadays the source of oil is gradually exhauslcd，and polIutions become more and more serious．Bio．butanol is a new potential biofuel，which has atlracted wide attention around the world．Bio—butan01 is considered to be hi