尿蛋白检测中药物对分析的干扰.doc

PAGE PAGE 1 尿蛋白检测中药物对分析的干扰 【摘要】　　目的：评价24种药物在尿蛋白检测中潜在的分析干扰。方法：在Urite-200上进行含药物尿液标本的检测，同时测定对照组尿液标本，比较分析两组数据。结果：超过治疗浓度的环丙沙星、氯喹试验呈阳性结果，氯喹在治疗浓度时，试验也呈阳性。结论：某些药物会影响试带法尿蛋白检测，导致检测结果假阳性。 【关键词】分析干扰；药物；尿蛋白 　　尿液分析是一种常规的检查项目，能为肾脏、泌尿系统疾及肾脏外疾病提供较有价值的信息。试纸条法对于白蛋白最敏感。这种蛋白的出现提示肾小球基底膜渗透性增加。很多药物可以影响试带法检测尿蛋白的结果。例如青霉素、甲苯磺丁脲等[1]，它们含磺基水杨酸，能沉淀尿液的白蛋白，从而干扰尿蛋白检测。鉴于药物对于尿蛋白检测干扰方面的报道很少，而尿液生化分析对于临床又如此重要，我们在本文中评价24种药物对尿蛋白化学检测的潜在的分析干扰。 　　1资料与方法 　　1.1药物 　　表1列出了待检的药物及其浓度。根据剂量和药代动力学数据，确定了三种浓度：高治疗浓度(Supratherapeutical,ST),治疗浓度(therapeutical,T)和低治疗浓度(subtherapeutical,sT)。 　　1.2试剂、设备 　　尿试纸条为桂林优利特-11A，自动尿化学分析仪为Urite-200。研究药物及其浓度(mg/dl)，(见表1)。表1药物及其浓度（略）注：NT表示未测试。 　　1.3标本 　　 　　尿液标本取自25岁～40岁的健康人（志愿者），此间没有接受任何药物治疗。 　　1.4方法学 　　分析方法参考干扰分析研究的章程[2]。 　　1.5药物与其测试浓度的选择待测药物的选择根据下述几个因素：治疗剂量，生物利用度，代谢以及是否能以原形从尿中排出[3]。治疗浓度的估计依据这两个因素：最大治疗剂量及一个70公斤人的每日平均尿量，根据这些数值计算出超治疗剂量浓度（10倍以上）及低治疗剂量浓度（10倍以下）。 　　1.6药物掺入尿液 　　根据计算好的浓度，精确称量药物的用量然后直接溶于尿液。 　　1.7对照物的标准化 　　试验采用三种尿液对照（无药物）：阴性对照（未作任何处理）、ldquo;弱阳性rdquo;和ldquo;强阳性rdquo;对照，阳性对照是向尿中添加一定量的蛋白而成，根据尿试纸条反应，ldquo;弱阳性rdquo;尿蛋白定为30mg/dl(+)，ldquo;强阳性rdquo;尿蛋白定为300mg/dl(+++)。 　　1.8潜在干扰的评估 　　取10ml尿液用于尿蛋白检测，以比较含有药物的尿样及对照尿样（无药物），高浓度的干扰测试重复8次，由于水溶性差的原因，5种药物只使用中低两种浓度（表1中用NT表示）。在高浓度中表现有干扰的药物，其中低浓度干扰测试分别重复8次，否则分别重复3次。测试中表现有干扰的含药物的尿样用磺柳酸法重新测试。 　　1.9统计分析 　　结果描述词(阴性、微量、1+、2+、3+)分别用数值表示（0,1,2,3,4）。对照尿样和药物添加尿样间的差异用统计软件Statistic6.0的来分析，Plt;0.05表示有统计学意义。 　2结果 　　大部分药物对尿蛋白检测没有显著的干扰，但在试验中发现3个药物在不同浓度中引起假阳性。与阴性对照及ldquo;弱阳性rdquo;对照相比，二磷酸氯喹(Chloroquinediphosphate)浓度为277mg/dl及27.7mg/dl时(高浓度与治疗浓度)显示有假阳性。环丙沙星（Ciprofloxacinhydrochloride,希普欣）只有在高浓度(分别为346mg/dl和138mg/dl)时显示会致假阳性。表2高治疗和治疗浓度药物对阴性对照尿与弱阳性对照尿的干扰（略）注：ST高治疗浓度，T治疗浓度，*Plt;0.01，*Plt;0.01。 　　3讨论 　　尿试条测试总蛋白是用浸有缓冲至pH3的四溴酚蓝纤维块，反应原理为ldquo;蛋白误差指示剂rdquo;，即有蛋白时，某种特定的化学指示剂呈现一种颜色，无蛋白时则显示另一种颜色。 　　许多干扰药物一般含有基础氮原子，奎宁在其奎宁环上有一个基础氮原子,它在水溶液中会质子化。氯喹是一个4-氨基喹啉衍生物,其侧链上带有两个质子化的氮原子。环丙沙星在其哌嗪环上也有质子化的氮原子[4]。 　　有1%用诺氟沙星治疗的病人会增加尿蛋白排出量，这被报告为诺氟沙星的生理干扰[3]，但根据可查的文献，没有报道和诺氟沙星结构有关的干扰。通常，成人使用诺氟沙星的剂量为500mg～750mg，每日两次[5]。肾耐受性研究显示志愿者的肾功能在观察期内一直正常[6]，只有一位58岁的妇女服用500mg诺氟沙星片剂后很快发生了急性肾衰，而未发现其它风险因子[