粪便隐血检测方法学探讨.doc

PAGE PAGE 1 粪便隐血检测方法学探讨 周斌，刘春国中华医学实践杂志2005年11月第4卷第11期 粪便中血红蛋白的检测可作为胃肠道出血的一个指标，愈创木酯法检测粪便隐血干扰因素多，灵敏性和特异性较差，而近年来发展的单克隆抗体法检测粪便隐血不受饮食限制，快速、简便、准确，方便临床。为了证实此法的优越性，笔者对人和5种动物不同浓度的血红蛋白，食用9种动物肉类和100例临床病人的粪便进行两种方法的比较，现将试验结果报告如下。 　　1材料与方法 　　1.1试剂 　　万华公司“速而准”粪便隐血单克隆抗体法试剂盒；愈创木酯粪便隐血试剂，参照文献［1］。 　　1.2方法 　　(1)用单克隆抗体法对5种浓度(0.2μg/ml、2μg/ml、20μg/ml、200μg/ml、500μg/ml)的人和5种动物(羊、牛、狗、鸽子、兔)的血红蛋白液进行检测。(2)用上述二种方法对食用9种动物(猪、羊、牛、兔、鸡、鱼、鸭、虾、狗)肉类各5例的粪便隐血进行检测。(3)用单克隆抗体法、愈创木酯法对100例临床常规粪便隐血检测病人粪便中的血红蛋白进行检测。 　　2结果 用单克隆抗体法对5种浓度的人和动物的血红蛋白液进行检测，结果单克隆抗体法隐血试验，可测出样本中微量的血红蛋白(0.2μg/ml)，这使得单克隆法对人体无症状的消化道微量出血更敏感。但动物血红蛋白各浓度检测结果均为阴性，说明了单克隆法隐血试验特异性强，敏感性高，不受食用肉类的干扰。用愈创木酯法对不同浓度的人血红蛋白液进行试验，发现浓度在0.2～90μg/ml时均为阴性，当达到0.1mg/ml时才阳性，也就是说它们对人体无症状的消化道微量出血不及单克隆法敏感。 用上述两种方法对食用9种动物(猪、羊、牛、兔、鸡、鱼、鸭、虾、狗)肉类各5例的粪便隐血进行检测，所得结果看出，食用动物肉类，对化学法(愈创木酯法)的便潜血试验结果影响很大，可使结果出现假阳性，而单克隆抗体法则不受影响。 用单克隆抗体法、愈创木酯法对100例临床常规粪便隐血检测患者粪便中的血红蛋白进行检测，所得结果：显示愈创木酯法阳性率比单克隆抗体法高30%。其中单克隆抗体法的14例患者与愈创木酯法均为阳性，经临床证实此14位患者为患有消化道出血、直肠癌、胃癌、肝癌、结肠炎、子宫癌转移、胃溃疡等疾病，而其中30例愈创木酯法阳性而单克隆抗体法阴性的病人经临床证实为食用过动物肉类或含过氧化物酶类蔬菜(如红萝卜、西红柿、菠菜、韭菜、芹菜、油菜、木耳菜等)。此结果表明单克隆抗体法测定粪便隐血无假阳性，而愈创木酯法假阳性率高，占30%，所以临床应用单克隆抗体法检测便潜血具有较好的准确性。 　　3讨论 　　胃肠道出血可由多种疾病引起，美国癌病协会估计早期诊断和及时治疗的情况下，每年死于此类疾病的2/3可挽救。Greegar认为，如果每年的常规体检中都同时做潜血试验，再加上一定数量的直肠检查和乙肠结肠镜检查，那么许多乙肠结肠癌在可治愈阶段可被检出。临床研究证实，粪便中带有癌肿的微量出血是早期结肠直肠癌唯一可以查出的异常现象，所以对粪便中微量血红蛋白的检出具有十分重要的意义。 　　诸如愈创木酯法之类的化学法检查粪便隐血存在许多干扰因素，结果表明检测前3天病人不可食用动物肉类、含过氧化物酶的新鲜蔬菜、铁剂、维生素C和某些药物。新鲜蔬菜中含有的植物过氧化物酶可催化过氧化氢分解，放出新生态氧，氧化色原（愈创木酯）出现假阳性反应；而铁剂、维生素C为还原性物质，可使过氧化氢还原，造成试验假阴性。而且此法的灵敏度低，当粪便中血红蛋白含量达到500mg/100g粪便时，才可检测出。 　　近年来，人血红蛋白的单克隆抗体的制备，可应用各种免疫技术来特异性地检测粪便隐血。从试验结果也可看出，单克隆抗体法仅特异性地针对人血红蛋白，其他动物肉类对此试验无干扰作用。含过氧化物酶的新鲜蔬菜，铁剂、维生素C及对化学法有干扰作用的某些药物对此法的结果均无影响。此法比愈创木酯法(化学方法)的灵敏度也要高很多，它可以检测出0.2μg/ml的血红蛋白(0.03mgHb/g粪便)，也就是说，它可检测出粪便中微量的血红蛋白，如前所述，这对胃肠道出血性疾病的早期诊断是非常重要的。 　　【参考文献】 　　1陆永绥，张伟民.临床检验管理与技术规程.杭州：浙江大学出版社，2003，346-347. 　　作者单位：314408浙江海宁，海宁市第三人民医院