HBV反基因对HBV复制的体内抑制作用.doc

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PAGE PAGE 1 HBV反基因对HBV复制的体内抑制作用 曾令兰高勇罗端德蔡淑清 反基因技术是利用三链DNA的构建而实现的。三螺旋形式寡核苷酸(TFO)以DNA双螺旋为靶物,通过与序列形成三螺旋DNA来阻止基因转录。我们在证实TF020在体外能够有效地抑制HBV复制的基础上,为研究TF020在体内对HBV复制的影响及对机体可能产生的副作用,我们将HepG2.2.15细胞接种裸鼠背部皮下制备能够分泌HBV毒粒的动物模型,用TF020局部注射肿瘤部位,再检测裸鼠血清中HBVDNA及HBV标志物以分析TF020在整体水平对HBV复制的抑制作用,其中HBVDNA下降101.59拷贝/m1,HBsAg及HBsAg抑利率分别达到21.8%和52.5%;并通过病理切片观察裸鼠肿瘤及肝脏组织的结构形态,明确TF020对肝脏的毒性作用。 一、实验材料 (1)裸鼠:5周龄,购自中科院上海药物的重约16克/只,共22只。 (二)HepG2.2.15细胞:为HBVDNA克隆传染人肝癌细胞HepG2的2.2.15细胞系,由美国MountSinai医学中心构建。该细胞系整合了HBV的全基因组,可分泌HBsAg,HBeAg及完整的Dane颗粒。 (三)TF020吸ODNcon:TF020序列为5,

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