玉米ZmCPK12基因真核表达载体的构建及转化.pdfVIP

新疆农业科学2叭2，49(7)：1190—1196 sciences xiI】jia“gAgdcultuml 201207 dol：10 1001—4330 003 6048“ls8n 玉米锄卯K12基因真核表达载体的构建及转化 张毓露1，郝晓燕2，足木热木2，刘小利2，陈果2，陈勋基2，黄全生2 (1．新疆农业大学农学院，鸟鲁木齐830052；2新疆农业科学院核技术生物技术研究所，鸟鲁木齐830091) 摘要：【目的】cDPK是一类依赖于ca2+而不依赖caM及磷脂的蛋白激酶，或类钙调素结构域的蛋白激酶， 是植物和低等动物所特有。研究为玉米cDPK基因家族在抗逆中的作用提供基础。【方法】构建玉米 z巩cPKl2基因真核表达载体是了解玉米中该基因功能的重要途径之一。实验利用RT—PcR技术扩增得到 533 大小为1 bp的玉米踟cPKl2基因，经限制性内切酶s以I和№‘I进行消化，将目的基因与真核表达质粒 pREP一5N连接，获得重组真核表达质粒ZmcPKl2—5Ⅳ。【结果】通过菌落PcR、双酶切及测序等方法进行鉴 定，重组真核表达质粒朊cP嗣2—5Ⅳ构建成功。制备酵母感受态，将重组质粒电击转人酵母中，酵母菌落 PcR结果显示电击转化成功。【结论】成功构建了玉米伽c尸K12基因真核表达载体，并且成功转化了酵母。 关键词：玉米；基因；真核表达载体；重组质粒构建 文献标识码：A 中图分类号：S513；s188+1 文章编号：1001—4330(2012)07—1190—07 ． ConstructionandTransfbrmationofEukarvotic fromMaize VectorZm(PKl2 Express of Gene ZHANGYu—lul．HA0Xiao—van2，ZurnurLlrnu2．LIUXiao—li2，CHENCu02， cHEN xun—ji2，HuANcQuan—shen旷 (1cof姆D，如ro加州，晒访。昭dg啦H如啪!№如郴渺，叶umqz 83009l，c^iw) sc加棚，uⅢ啪i D，№c胁rⅡ以B如zog托z扎c愚肿fog如，艇彬。增Ac口如可0厂A咖c¨zfHmf andlower a kinase on animals，is Abstra“：【objective】cDPKonlyfound油pIants protein dependent CaM class kinage．Theof Ca．+butnoton andthe a ofcalmodulin