氯美噻唑对小鼠急性酒精性脂肪肝的拮抗作用研究-劳动卫生与环境卫生学专业毕业论文.docxVIP

原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不 包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研 究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明 的法律责任由本人承担。 论文作者签名： 欧鱼举缢 日期：圣!!垒!互：圣旦 关于学位论文使用授权的声明 本人同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的印刷件 和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位 论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩 印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：!叠薹耋导师签名：堕日期：銎虹z9 万方数据 山东大学硕士学位论文目录 山东大学硕士学位论文 目录 摘要 1 英文摘要 ．5 符号说明 ．9 材料与方法 ．13 结果 ．25 讨论 ．34 结论 ·44 参考文献 45 致谢 ·58 攻读学位期间发表的学术论文目录 ··59 学位论文评阅及答辩情况表 ··60 万方数据 山东大学硕士学位论文CONTENTS 山东大学硕士学位论文 CONTENTS Abstractin Chinese ．．1 Abstract ．5 Abbreviation ．．9 Introduction ．．1 0 Materials and methods 1 3 Results ．25 Discussion ．34 Conclusion 44 Ref．erences ．45 Acknowledgement 58 List ofp印ers published ·59 1’able ofreview ofdissertation and debate ．．60 万方数据 山东大学硕士学位论文氯美噻唑对小鼠急性酒精性脂肪肝的拮抗作用研究 山东大学硕士学位论文 氯美噻唑对小鼠急性酒精性脂肪肝的拮抗作用研究 摘要 研究目的 酒精是一种常见的肝脏毒素，过量的酒精摄入可以导致酒精性肝病 (alcoholic liver disease，ALD)。ALD是一种逐渐进展的肝脏疾病，包括酒精性 脂肪肝(alcoholic fany liver，AFL)、酒精性肝炎、肝纤维化及肝硬化等多种病 理学表型。AFL是ALD早期出现的可逆阶段，被视为对ALD进行防治的最佳 干预阶段。细胞色素P4502El(cytochrome P4502El，CYP2E1)是CYP450超家 族的一员，也是微粒体乙醇氧化酶系统(microsomaI ethanol-oXidizing system， MEOS)的主要成员；活化的CYP2El可以产生大量的活性氧(reactive oxygen species，ROS)。已有研究证实了CYP2E1在慢性AFL发病中扮演着重要角色， 其分子机制包括过氧化物酶体增殖物活化受体a(peroxisome prolif．erator．aCtivated recepto卜cc，PPAR．Q)活性降低等因素。 酒精对肝脏的损伤受饮酒剂量和饮酒方式等多种因素的影响。Binge drinking 是指短时间内摄入大量酒精的饮酒方式，可以导致急性酒精性肝损伤如脂肪肝、 肝炎和肝细胞坏死等。流行病学资料表明全球范围内binge drinking的发生率正 在逐年增长。以往关于AFL的研究多集中在慢性AFL，而binge drinking诱导的 AFL却较少地受到关注。在慢性AFL发病中起关键作用的CYP2E1是否是导致 急性AFL发病的关键因素?CYP2El的抑制剂是否能够拮抗binge drinking导致 的急性肝损伤?这些问题仍待解答。 本研究拟建立binge drinking诱导的急性AFL小鼠模型，研究CYP2E1特异 性抑制剂氯美噻唑(Chlonnethiazole，CMZ)对急性AFL的拮抗作用，并从氧化 应激、线粒体损伤、肝脏脂肪合成分解代谢相关信号通路等方面进行分子机制探 讨。 研究方法 SPF级雄性昆明小鼠(18．22 g)30只，适应性饲养3天后，随机分成3组 (n=lO)：对照组，模型组和CM刀乙醇组。CMZ，乙醇组和模型组小鼠分别给 1 万方数据 山东大学硕士学位论文予CMz(50 山东大学硕士学位论文 予CMz(50 mg／I(g bw)和等体积的生理盐水；2 h后两组小鼠通过灌胃给予3 次5 g／l(g bw乙醇(25％，w／V，两次之间间隔12 h)诱导急性AFL。对照组小鼠 给予等体积无菌生理盐水和等热量／等体积的麦芽糖糊精溶液。末次酒精给予4 小时后，摘眼球取血分离血清；随后处死动物，迅速分离肝脏，