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抗水稻黄单胞菌深海独岛枝芽胞杆菌A493及其活性物质研究-微生物学专业毕业论文.docx

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华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 是否保密 不 如需保密,解密时间 年 月 日 口 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果.尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果,也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料,指导教师对此进行了审定.与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明,并表示了谢意。 研究生签名:.爿之步净 时间:知ft年6月弦日 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定,即学生必须按照学 校要求提交学位论文的印刷本和电子版本;学校有权保存提交论文的印刷版和电子版, 并提供目录检索和阅览服务,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位 论文.本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全 部或部分内容,并授权中国科学技术信息研究所和北京万方数据股份有限公司将本人 学位论文收录到《中国学位论文金文数据库》,并进行信息服务(包括但不限予汇编、 复制、发行、信息网络传播等),同时本人保留在其他媒体发表论文的权力. 注:保密学位论文(印涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论 文)在解密后适用于本授权书. 学位论文作者签名:为。夕捧 导师签名:名向曼钛础考刍自 签名日期: 如,/年g月心日 签名日期: 弘77年‘月/J,-日 抗水稻黄单胞菌深海独岛枝芽胞杆菌A493及其活性物质研究目 抗水稻黄单胞菌深海独岛枝芽胞杆菌A493及其活性物质研究 目 录 摘 要 .I Abstract ..II 1一前言I|U舌 11 1.1植物侵染性病害概况 1 1.1.1细菌性植物病害 .1 1.1.2真菌性植物病害 .1 1.1.3病毒性植物病害 2 1.1.4线虫性植物病害 。2 1.2水稻白叶枯病的危害及防治概况 2 1.2.1抗病种质资源防治 - 一3 1.2.2农业防治 。3 1.2.3化学防治 ..3 1.2.4生物防治 4 1.3海洋微生物活性物质的研究进展 4 1.3.1海洋微生物是活性物质的主要来源 .5 1.3.2海洋微生物活性物质的主要分类 ..6 1.3.2.1生物碱类 6 1.3.2.2氨基糖苷类 一j 6 1.3.2.3肽类 7 1.3.2.4大环内酯类 7 1.3.2.5含硫和含卤类 8 1.3.2.6萜类 8 1.3.2.7醌类 9 1.3.2.8杂环类 .9 1.3.2.9其他类型化合物 .9 1.4海洋枝芽胞杆菌属细菌的研究进展 .10 1.5本课题的研究目的及意义 .10 2实验材料与方法 12 华中农业大学201 华中农业大学201 1届硕士研究生学位论文 2.1病原指示菌 ..12 2.2海洋菌株 ..13 2.3培养基 1 3 2.4实验主要仪器以及试剂 ..13 2.5海洋拮抗细菌筛选 一14 2.5.1植物病原菌培养方法 .14 2.5.2海洋细菌培养方法 .15 2.5.3拮抗菌株初筛 1 5 2.5.4拮抗菌株复筛 1 5 2.5.5抑菌谱测定 1 5 2.6深海独岛枝芽胞杆菌A493产活性物质性质研究 15 2.6.1活性物质传代稳定性研究 ... .1 5 2.6.2温度处理 l 6 2.6.3酸碱处理 .1 6 2.6.4紫外照射处理 1 6 2.6.5蛋白酶处理 -.. 1 6 2.6.6超滤判断分子量大小 16 2.6.7样品的有机溶剂溶解性 .16 2.6.8酸沉淀和硫酸铵沉淀处理 17 2.7 A493产活性物质的分离纯化和鉴定 .17 2.7.1活性物质制备 ..17 2.7.2活性物质粗提取 17 2.7.3离子交换法分离 1 7 2.7.4硅胶板分离 l 8 2.7.5活性物质的Doskochilova系纸层统析 .18 2.7.6苯磺酸型固相萃取柱净化 19 2.7.7 LC—MS 1 9 2.8 A493发酵条件的初步优化 .20 2.8.1种子液及发酵液制备 20 抗水稻黄单胞菌深海独岛枝芽胞杆菌A493及其活性物质研究2.8.2发酵条件单次单因子实验 抗水稻黄单胞菌深海独岛枝芽胞杆菌A493及其活性物质研究 2.8.2发酵条件单次单因子实验 20 2.8.2.1不同接种菌龄对活性物质产量的影响 一20 2.8.2.2不同接种量对活性物质产量的影响 .20 2.8.2.3不同发酵时间对活性物质产量的影响 ... 20 2.8.2.4不同发酵温度对活性物质产生量的影响 .20 2.8.2.5不同装液量对活性物质产生量的影响 一20 2.8.2.6不同摇床转速对活性物质产生量的影

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