棉籽壳低聚木糖的分离纯化及其活性初步研究-食品工程专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 Purification and preliminary activity of cotton seed hulls Xylooligosaccharides A Dissertation Submitted to Shihezi University In Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of Engineering By Wang Meng (Food Engineering) Dissertation Supervisor: Prof. Jun-mao Tong June, 2014 摘 要 随着人们生活水平的提高，功能性食品正在成为 21 世纪的主导食品。功能性低聚糖除了具有普 通食品的营养价值和感官享受以外，还具有调节生物活性的功能。低聚木糖亦称为木聚糖，主要是 以富含木聚糖的植物资源，如棉籽壳、玉米芯、和玉米秸秆等为原料，经过酶水解后，再经分离精 制而得到的。但我国现在生产得到的低聚木糖产量和纯度远远落后于其他国家。因此，开展对以棉 籽壳为原料生产的低聚木糖进行分离纯化成为必要。 本论文主要从三个方面进行了研究：棉籽壳木聚糖酶解液脱色工艺条件优化、棉籽壳低聚木糖 分离纯化及纯化低聚木糖活性的初步研究。 1. 棉籽壳木聚糖酶解液脱色工艺及其条件优化 以棉籽壳为原料，采用碱液预处理提取木聚糖，然后酶解制备棉籽壳低聚木糖液。棉籽壳低聚 木糖粗品呈褐色，里面含有许多色素分子，无机盐离子，这些杂质分子的存在严重影响了低聚木糖 的品质及功能性质。本文采用酸析、活性炭和阴离子交换树脂三种不同方法对木聚糖酶解液进行脱 色，结果表明：（1）酸析脱色的最佳工艺条件是：pH 3.0，温度为 50℃，在该条件下处理一段时间， 脱色率为 49%；（2）对四种活性炭的脱色效果做了比较，HAC 型粉状活性炭脱色效果最好，其最佳 工艺条件是：活性炭添加量为 2.08g/L，温度为 47℃，初始 pH 3.2，在此条件下脱色 51min，脱色率 可达 74.36%；（3）D290 树脂对粗糖液的脱色效果较好，其静态脱色优化条件是脱色温度 45℃，初 始 pH 6，树脂添加量 5%，脱色 3h，脱色率可达 78.4%；（4）酸析后经树脂脱色，脱色率达到 82.9%。 2.棉籽壳低聚木糖纯化工艺的研究 选用超滤去杂法，透析除小分子法和 Sephadex G-15 柱层析对样品进行进一步分离纯化。结果 表明：（1）在单因素实验的基础上，用响应面优化得出超滤纯化的最佳工艺：操作压力 0.8MPa，pH 为 7.0，操作温度为 23℃，样品质量浓度为 1.0mg/mL，低聚木糖透过率达到 92.17%；（2）采用 Sephadex G-15 葡聚糖凝胶柱进一步纯化低聚木糖，得到低聚木糖有效成分木二糖和木三糖的含量可达 84.66%；（3）在波长 200～400nm 范围内，采用紫外吸收光谱对层析洗脱液进行全波长扫描，由结 果可知，层析洗脱液在波长为 260nm 和 280nm 处均无明显的吸收峰，由此说明溶液中蛋白质、核酸 等杂质已被除尽。 3. 棉籽壳低聚木糖活性的初步研究 以维生素 C 和维生素 E 为对照，对棉籽壳低聚木糖对羟基自由基、超氧阴离子自由基和 DPPH 自由基的清除能力进行测定。结果显示：低聚木糖具有一定的清除羟自由基、超氧阴离子自由基和 DPPH 自由基的能力，并且清除自由基的能力与低聚木糖的浓度呈正相关性。清除自由基的能力都 有维生素 C维生素 E低聚木糖。最后，研究了低聚木糖对益生乳酸菌的体外增殖和金黄色葡萄球 菌、大肠杆菌对低聚木糖的利用实验。结果初步验证了棉籽壳低聚木糖具有促进乳酸菌增殖的作用， 棉籽壳低聚木糖不易于被金黄色葡萄球菌和大肠杆菌利用，所以可以考虑用低聚木糖替代蔗糖等应 用于食品，抑制食品中金黄色葡萄球菌的生长。 关键词：低聚木糖；分离；纯化；凝胶过滤层析；抗氧化 I Abstract As people living standard rise, functional foods are becoming main food of the 21st century. The functional Xylooligosaceharides have been a kind of important funetional food additive because they have special physiological funetion. But now in China the low poly yield and purity of xylose lags far behind othe