抗生素对梨叶片不定梢诱导的影响研究-果树学专业毕业论文.docxVIP

摘 摘 要 根癌农杆菌介导的植物遗传转化方法是植物转基因研究中最有效而且应用最广 泛的方法。采用该方法迸行遗传转化时，必须要对受体材料进行抗生素敏感性测定， 这样才能保证有效地抑制农杆菌的生长而不影响外植体的正常分化和再生，同时减少 假转化体的出现，提高基因转化效率。为此，本试验研究了氨苄青霉素(AmpiciLLin， Amp)、羧苄青霉素(Carbenicillin，Carb)、头孢霉素(Cefotaxime，Cef)、卡那霉素 (Kanamycin，Km)和新霉素(Neomycin，Nm)对‘巴梨’(枷communisCV．Bartlett)、 ‘考密斯’(P communis cv．Cornice)和‘身不知’(PpyrifoliaCV．Shenbuzhi)叶片愈 伤组织和不定梢诱导的影响，其试验结果如下： 1．通过考察不定梢再生率和平均每叶梢数两个指标，三个品种最合适的诱导培 养基及植物生长调节剂组合和在其培养基上叶片的不定梢诱导率分别是： ‘巴梨’：NN69+IBA0．1mg／L+TDZ0．9mg／L，不定梢诱导率达69．26％。 ‘身不知’：NN69+NAA0．1mg／L+TDZl，6mg／L，不定梢诱导率达76．67％。 ‘考密斯’：MS+IBA0．1mg／L+IDZA．0mg／L，不定梢诱导率达66．67％。 2．通过考察出愈率、不定梢再生率、平均每叶梢数以及死亡率四个指标，不同 抗生素对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响结果如下： (1)Amp浓度在50～300mg／L内对‘身不知’叶片出愈率和不定梢再生率的影 响较小，Amp在高浓度下(500mg／L)极显著地抑制‘身不知’叶片的出愈率和不定 梢再生。低浓度(一100mg／L)的Amp对‘考密斯’叶片的出愈率和不定梢再生率 影响极小，而在高浓度下(500rag／L)，Amp完全抑制了‘考密斯’叶片不定梢的发 生。Amp浓度在SOOmga。以内时对‘巴梨’叶片出愈率和不定梢诱导率的影响较小。 (2)Carb浓度大于200mg／L时极显著抑制‘巴梨’叶片愈伤组织和不定梢的分 化。Carb浓度在50～200mg／L内对‘身不知’叶片的出愈率影响不明显，而对不定 梢的抑制却达极显著水平；Carb在较高浓度下(400rag／L)完全抑制了‘身不知’叶 片不定梢再生。‘考密斯’叶片对Carb的反应较为敏感，低浓度的Carb(50mg，L) 极显著地抑制‘考密斯’叶片的出愈率和不定梢再生率。 (3)Cef浓度在50～300mg／L时对‘巴梨’叶片出愈率和不定梢再生率的影响 较小，较高浓度的Cef(≥400mg／L)对‘巴梨’叶片的不定梢诱导表现出一定的抑 制作用。Cef对‘身不知’和‘考密斯’叶片的出愈率和不定梢诱导率影响极小，‘身 不知’和‘考密斯’叶片在高浓度的Cef下(500rag／L)仍有较高的再生率。 不知’和‘考密斯’叶片在高浓度的Cef下(500rag／L)仍有较高的再生率。 (4)20mg／L的Km完全抑制了‘巴梨’和‘身不知’叶片不定梢的发生。10mg／L 的Km不仅使‘考密斯’叶片无不定梢发生，而且使其部分叶片白化死亡。 (5)Nm在低浓度下(10rag／L)极显著抑制‘巴梨’叶片不定梢的发生。当Nm 浓度达60mg／L时，完全抑制了‘巴梨’叶片不定梢的发生。较低浓度的Nm(、40mg／L) 对‘身不知’叶片的出愈率影响较小，但极显著抑制了其叶片不定梢再生。当Nm浓 度达S0mg／L时，‘身不知’叶片不但无不定梢发生，而且部分叶片白化死亡。20mg／L 的Nm完全抑制了‘考密斯’叶片不定梢的发生。 关键词：梨(助／dS sp．)；抗生素；出愈率；不定梢再生 Effects Effects of Antibiotics on Adventitious Shoot Regeneration from／n Htro Leaves of Pear Cultivars Liu Shufang Supervised by Prof．Tang Haoru (College ofForestry and Horticulture，SichuanAgricultural University，Ya’an，Sichuan，China。 625014) ABSTRACTS Genetic transformation using Agrobacterium tumefaciens provides a means of comprehensive and effective．Effects of Ampicillin(Amp)，Carbenicillin(Carb)， Cefotaxime(Cef)，Kanamycin(Km)and Neomycin(Nm)on cal