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独创性声明
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华
华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文
I
I
摘 要
纳米科技在给人类带来经济效益和社会效益的同时,也给环境和生物体本身造 成危害,所以如何降低纳米生物毒性具有十分重要的科学意义和应用价值。本文以 HepG2 细胞为对象,在测定了纳米 TiO2 毒性的基础上,选用丹参、黄芪提取液配伍 亚硒酸钠进行干预,研究了它们降低毒性的效果及其初步机理,得到如下结果:
1.通过 MTT 检测细胞成活率,考察不同浓度的纳米 TiO2 悬浊液对于细胞的毒 性。结果表明纳米 TiO2 可明显抑制细胞生长,0.25g/L 纳米 TiO2 干预细胞的成活率 是正常细胞的 58.8%(P0.01),而且其成活率随纳米 TiO2 浓度的增加而降低。
2.使用一定浓度的纳米 TiO2 作用细胞,通过 MTT 检测不同药物浓度对细胞的 保护作用。发现丹参、黄芪提取液和亚硒酸钠(硒在 100nmol/L 以下)均可以提高 纳米 TiO2 损伤条件下细胞的成活率,且在一定的浓度范围内随着浓度的提升,细胞 成活率升高。表明三种药物抑制纳米 TiO2 对细胞的损伤有一定效果,其最佳配伍是 1000mg/mL 黄芪、750mg/mL 丹参和 100nmol/L 硒组。
3.从抗氧化的角度初步研究了单一组分和复合组分抑制纳米 TiO2 损伤细胞的机 理。发现经过药物干预,染尘细胞的凋亡小体,caspase 3, ROS,MDA,NO 和 iNOS 较之粉尘组均有明显降低(P0.01)。而与单一组分药物相比,复合组分效果更加明 显(P0.01)。SOD 和 GPx 活性与粉尘组相比皆有显著提高(P0.01);与同浓度单 一药物组相比,活性也相对较高(P0.01)。三种药物混合之后没有发现药性相克情 况。这些结果表明纳米 TiO2 通过氧化应激诱发了细胞凋亡,使细胞的成活率下降, 而丹参、黄芪提取液配伍亚硒酸钠通过提高细胞的抗氧化能力,抑制了纳米 TiO2 的 氧化损伤。
以上结果虽然是初步的,但对今后防治纳米粉尘的危害,尤其是通过食药同源 类中药和微量元素硒在防治纳米毒性方面提供了有益的启示。
关键词:HepG2 细胞;纳米二氧化钛;黄芪;丹参;亚硒酸钠;药食同源
II
II
Abstract
While nanotechnology has brought huge economic and social benefits to human, it has also posed great threats to the environment and the organism itself, which explains the importance and value of reducing the biotoxicity. Via researching the paroxysm mechanism of pneumoconiosis, this paper establishes a vitro model by adding nanometer-scale TiO2 to treat HepG2 cells, intervene the process by Milkvetch Root, Savia miltiorrhiza and Sodium Selenite. By observing the treatment results and analysing the mechanism, this paper draws key conclusions as follow:
The toxic effect of nano TiO2 of different concentration on the survival of
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