台湾线虫草发酵菌丝体的自由基清除活性成分研究.docVIP

台湾线虫草清除自由基活性较优菌株及提取溶剂的选择 .................35 台湾线虫草 RCEF0868 菌株的自由基清除活性定量分析 .................35 RCEF0868 菌株活性组分的 HPLC 分离和 LC-MS 分析.....................35 RCEF0868 菌株清除 DPPH 活性组分的提取优化 ...............................36 参考文献.........................................................................................................37 致 谢.............................................................................................................42 作者简介.........................................................................................................43 攻读硕士期间发表的学术论文.....................................................................43 VII 万方数据 1 文献综述 虫生真菌（Entomogenous Fungi）广义上指以虫体为生长介质，与虫体发生寄生、 腐生、共生等关系的一系列真菌，本文狭义上指那些能够穿透昆虫，在其体内增值导 致昆虫血淋巴中可溶性营养丧失，对其组织入侵或消化，有时还由于释放毒素而令寄 主昆虫死亡的“昆虫病原真菌”（Entomopathogenic Fungi）[1]。虫草属是昆虫病原真菌 中十分重要的一大类群，绝大多数能感染昆虫，并从其头部或体表长出子实体而构成 虫 、 菌 复 合 体 即 虫 草 [1-2] 。 截 至 2014 年 3 月 ， 国 际 真 菌 名 录 数 据 库 （/Names/NAMES.ASP）列出的种名已达 536 种[3-5]，目 前在中国报道的已知虫草属真菌约 139 种，结合近几年新种的报道，约有分布于我国 31 个省区的 150 余种[5-6]。 由于长期的协同进化作用，使得虫生真菌成为一类专化性较强的昆虫病原微生 物，它们为生物防治带来了新的途径和材料，其中虫草属更是最有潜力发现新的天然 活性物质的传统中药材[7-8]。我国最早将冬虫夏草（Ophiocordyceps sinensis）野生资 源正式作为药物载入书典，目前，已被记载有药用价值的种类还有蛹虫草（C. militaris）、古尼虫草（C. gunnii）、大团囊虫草（E. ophioglossoides）、蝉 花（I. cicadae） 等[9-13]。近年来，虫草属真菌在有效成分、药理作用和人工培养等方面的应用研究越 来越受到科研人员的关注，并取得了一定的进展[14]，但种类上主要集中在冬虫夏草、 蛹虫草等少数种[15-16]，成分上主要在于多糖、粗脂肪、氨基酸、甘露醇、腺苷、甾醇、 无机元素等[17-19]常规成分的测定以及相应的与冬虫夏草的初步比较，少部分具体活性 物质得到分离并进行了结构鉴定。 虫生真菌中活性成分研究概述 虫生真菌的虫草属中包含多种名贵的中药材料，由于其存在一些特有的药理作用 而成为众多学者研究的热点。药理作用与其相应的有效成分是密不可分的。近几十年 来，研究人员对虫生真菌有关活性成分展开了广泛的研究与开发，如从冬虫夏草、蛹 虫草中分离得到的虫草酸、虫草素等。不仅仅是基础的代谢产物，虫生真菌的次生代 谢产物也愈加受到研究者们的重视，通过不同的方式，这些次生代谢产物受到了深入 的探讨[16,19]，并且被认为是最有潜力开发出新的天然活性化合物的类群。尽管如此， 对于虫生真菌中有关活性物质的开发还不够深入，除冬虫夏草、蛹虫草、白僵菌、绿 僵菌和拟青霉等[16]少数种，大部分虫生真菌的代谢产物组成还未被报道，少数活性成 分的化学结构得到了最终确定。将这些活性组分简要分为以下几类。 核苷类物质 虫生真菌中最早被人们鉴定的核苷类物质当属虫草素，加拿大的研究者 1 万方数据 Cuningham 等于 1950 年对其进行了首次报道，后来被确定为 3’一脱氧腺嘌呤核苷(3’ 一 deoxyadenosine) [20]，蛹虫草中便含有虫草素。它除了对鸟结核杆菌 Mycobacterium avium 和枯草杆菌 Bacillus subtilis 有拮抗作用外，