类风湿关节炎外周血单个核细胞的组蛋白乙酰化研究-风湿免疫学专业论文.docxVIP

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厦门大学学位论文著作权使用声明本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施 厦门大学学位论文著作权使用声明 本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施 办法》等规定保留和使用此学位论文,并向主管部门或其指定机 构送交学位论文(包括纸质版和电子版),允许学位论文进入厦 门大学图书馆及其数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学 位论文加入全国博士、硕士学位论文共建单位数据库进行检索, 将学位论文的标题和摘要汇编出版,采用影印、缩印或者其它方 式合理复制学位论文。 本学位论文属于: ( )1.经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论 文,于 年 月 日解密,解密后适用上述授权。 , ( √)2.不保密,适用上述授权。 (请在以上相应括号内打“√”或填上相应内容。保密学位论 文应是已经厦门大学保密委员会审定过的学位论文,未经厦门大 学保密委员会审定的学位论文均为公开学位论文。此声明栏不填 写的,默认为公开学位论文,均适用上述授权。) 矽7名 耋3-镡年 月n日 声明人(签名): 万方数据 摘要摘要 摘要 摘要 研究背景 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种常见的全身性自 身免疫疾病,以慢性、进行性、侵袭性关节炎为主要临床表现。该病发病机制尚 不明确,研究其发病机制对临床指导治疗具有极其深远的意义。组蛋白乙酰化在 RA的发病机制中具有重要作用。组蛋白乙酰化是一种可逆的动态过程,主要由 组蛋白乙酰转移酶(histone acetylase,HATs)和组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)协调修饰。既往研究中,Huber,L.C.等人的研究显示, HDACI在RA滑膜组织中的表达较0A和健康对照组是降低的,并且HDACs总体活 性减低,而后来Tomoko Kawabata等人的研究结果与之恰恰相反,结果显示HDACI 在RA滑膜组织中的表达是增高的,且HDACs总体活性增高。据既往研究推测, 恢复HDACs活性可能对RA的治疗有所帮助,但也有研究指出组蛋白去乙酰化酶 抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACi)在治疗动物模型的关节炎和 其他慢性炎症中取得了良好的成效,以上研究结果及结论存在矛盾。再者,组蛋 白乙酰化作用在RA外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear celis, PBMCs)中的研究相对较少,仅有Eric Toussirot等学者研究了RA患者PBMCs 中HATs与HDACs的失衡等报道,但并没有分析PBMCs中HDACs的表达情况。因 此,我们在此次课题中,研究了RA外周血PBMCs中HDACs的表达,并检测其HDACs 总体活性,分析HDACs的表达和HDACs总体活性与RA疾病活动度指标的相关性, 从而初步明确组蛋白乙酰化修饰在RA患者PBMCs中的作用,进一步揭示RA的发 病机制。 研究目的 明确RA患者PBMCs中HDACs的表达及其总体活性,并分析HDACs 的表达及总体活性与RA疾病活动度指标之间的关系,从而进一步揭示RA的发病 机制。 方法 分别采集年龄及性别相当的类风湿性关节炎患者34名(实验组)及健康 参与者34名(对照组)外周血,分离出PBMCs,提取其RNA及总蛋白、核蛋白, 采用荧光定量PCR(qPCR)及免疫印迹法(western blot)检测实验样本HDACs 的表达情况:应用HDAC Assay Kit试剂盒检测其HDACs总体活性,统计RA患者 Ⅳ 万方数据 摘要ESR、CRP、DAS28等疾病活动度相关临床资料,并分析HDACs的表达及总体活性 摘要 ESR、CRP、DAS28等疾病活动度相关临床资料,并分析HDACs的表达及总体活性 与RA相关疾病活动度指标之间的相关性。 结果 结果显示,RA患者外周血PBMCs中HDACI、HDAC2在mRNA和蛋白水平上 的表达较健康对照组明显减低(p0.05),虽随RA疾病活动度指标ESR、CRP、 DAS28的增高而降低,但不具有统计学意义(P0.05)。RA患者PBMCs细胞核 中HDACs的总体活性较健康对照组明显降低(p=0.0001),并且随RA疾病活动 度指标ESR、CRP的增高而降低(P0.05),虽也随着DAS28的增高而降低,但不 具有统计学意义(P0.05)。 结论HDACI、HDAC2 mRNA和蛋白水平上的表达及细胞核HDACs总体活性在RA 患者PBMCs中表达明显减低,并且随RA疾病活动度指标的增高而降低,因此, 组蛋白乙酰化修饰可能参与了RA的发病。 关键词 类风湿关节炎表观遗传学组蛋白乙酰转移酶组蛋白去乙酰化酶 细胞核组蛋白去乙酰化酶总体活性 V 万方数

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