课件：十五基因治疗.ppt

Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 为安全起见，在临床试验之前，必须在动物研究中 达到三项基本要求： 1)外源的基因能导入靶细胞并维持足够长期有效； 2)该基因要以足够的水平在细胞中表达； 3)该基因应对细胞无害。 第五节、基因治疗存在的问题 一、导入基因的安全性 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 体细胞Gene治疗符合伦理道德，没有争议。 生殖细胞Gene治疗可能改变正常人的遗传特征，存在某些争议。然而生殖细胞的基因治疗又是一个不容回避的课题，因为它比体细胞基因治疗更为彻底。所以，随着分子生物学技术的发展，Gene治疗技术的成熟，将回答伦理道德方面的问题，相信生殖细胞的基因治疗将会被人们接受。 第五节、基因治疗存在的问题  二、Gene治疗与社会伦理道德 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 1、单基因缺陷疾病 2、仅限体细胞的基因治疗 3、靶细胞易获取、培养、及回输体内。 4、治疗效果应胜过对病人的危害。 5、表达水平无需调控且无副作用。 6、需经动物实验验证安全可行。 第六节、基因治疗产业的未来展望一、基因治疗应满足的条件 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 1、难以获得真正有治疗作用的基因。 2、外源基因的表达难以在体内精确调控。 3、体细胞经体外培养后，其生物学特性会有 改变。 4、过多的外源蛋白对机体带来可能的影响。 5、随机整合潜在的威胁。 第六节、基因治疗产业的未来展望二、基因治疗有待解决的问题 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 目前基因治疗的大门已打开，一旦世界上第一个 基因治疗产品被商业化推出，基因治疗行业将迅 速形成巨大的市场，成为二十一世纪新的经济增 长点。这种成功将带来巨大的社会效益和经济效益。 第六节、基因治疗产业的未来展望三、基因治疗产业的未来展望 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 分子杂交与印迹技术的原理 核酸分子杂交 (nucleic acid hybridization ) 在DNA复性过程中，如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中，或把DNA与RNA放在一起，只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定的碱基配对关系，就可以在不同的分子之间形成杂化双链(heteroduplex) 。 第二节 基因治疗的基本程序五、外源基因的表达及检测 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 复性 RNA DNA 第二节 基因治疗的基本程序五、外源基因的表达及检测 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 印渍技术 (Blotting) 首先由Edwen Southern在1975年提出。 Blotting即“印渍”，指将存在于凝胶中的生物 大分子转移（印渍）到固定化介质是病加以 检测分析的技术，目前广泛应用于DNA、RNA、 和蛋白质的检测 第二节 基因治疗的基本程序五、外源基因的表达及检测 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 探针技术 (probe) 将一小段已知序列的核酸片段用放射性同位素、 生物素或荧光染料对它的末端或全链进行进行标 记，称为“探针”然后用于分子杂交，杂交后通过 放射自显影、荧光检测或显色技术，使杂交区带 显现出来 第二节 基因治疗的基本程序五、外源基因的表达及检测 Zhejiang Provincial Key Lab of Medical Genetics 理想探针标记的特性 1. 高灵敏度； 2. 与探针的结合不能影响该分子的结构； 3. 与探针的结合不影响探针的主要理化性质； 4. 用酶促方法标记时，应该不影响酶促反应； 5. 标记后的检测方法具有高灵敏度和高特异性； 6. 具有化学稳定性、检测方