快速溶剂萃取-液相色谱-三重四级杆质谱法测定饲料中的兽药多残留-药物分析专业论文.docxVIP

华中科技大学硕士学位论文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE PAGE 1 快速溶剂萃取-液相色谱-三重 四级杆质谱法测定饲料中的兽药多残留 研究生：叶梦寒 导 师：彭彦 副教授 摘 要 兽药残留(residues of veterinary drug)是指用药后蓄积或存留于畜禽机 体或产品（如 鸡蛋、奶品、肉品等）中原型药物或其代谢产物，包括与兽药 有关的杂质的残留，一般以μg/ml或μg/g计量。在动物源食品中较容易引起 兽药残留量超标的兽药主要有磺胺、氟喹诺酮等各类抗生素类药物。 目前，畜牧业养殖中出现了将几种兽药以低剂量水平组合象 ―鸡尾酒‖ 样的协同效应发挥作用[1]，这导致单一类药物的检测方法已无法完全保障食 品安全。同时，为应对目前食品安全中日益增多的检测项目和日渐严格的残留 限量标准，开发高通量、快速、准确、灵敏的兽药多残留分析技术，同时对多种 类残留物质进行分析，监督控制食品污染和保证食品质量，已成为刻不容缓的任 务。 本课题建立了快速溶剂萃取（ASE）-液相色谱-三重四级杆质（LC-MS/MS） 测定饲料中磺胺类抗生素、氟喹诺酮类、β-受体激动剂、硝基咪唑类、林可霉 素、大环内酯类、工业染料、四环素类抗生素八类化合物残留的方法。此检测方 法应用于饲料，为形成较完整的兽药多残留分析方法标准体系奠定了基础，本方 法样品的前处理简便易行，能有效提取其中50种兽用药物，能灵敏、准确的检测 兽药的残留物，与单残留分析方法相比，有望提高工作效率。本课题建立的快速、 灵敏的兽药多种残留物的检测方法，为大量饲料样品的兽药残留的筛查，监督控 制食品污染和保证食品质量提供有效的技术支持。 本研究分为三个部分： 1. 兽药多残留分离检测条件筛选 实验对质谱参数、色谱分离条件、样品前处理及净化方法进行优化。待测样 品用含 1%甲酸的乙腈-二氯甲烷（体积比为 8∶2）混合溶剂在 80℃、103.4Mpa （1500psi）条件下用快速溶剂萃取仪 Dionex ASE 200 萃取，用 C18 SPE 小柱净 化后，定容至 1ml，在甲酸-乙腈-水流动相体系下梯度进样分析，采用液相色谱 -串联质谱法分析测定。 2. 对兽药多残留检测方法学研究 为建立兽药多残留检测的方法，我们对方法的回收率和精密度进行考察，本 实验以空白样本为本底，添加不同量的混合标准溶液，按所建立方法测定各种目 标物的回收率和相对标准偏差，结果令人满意。通过外标法定量，50 种目标分 析物在 1，5~200 μg/L 线性范围内线性关系良好，在 5、25、100 μg/kg 3 个添加 水平下，回收率在 70%～92 %之间，相对标准偏差在 3.8%～14.4%之间，以信噪 比 S/N=10 确定方法对 50 种药物的定量检测限(LOQ)为 0.5～2.21 μg/kg。 3.兽药多残留检测方法的应用 为考察本方法的可行性和有效性，采用所建立的方法对 10 份饲料样品进行 处理，进液质分析，检测出一份甲硝唑的阳性样品，并通过二级质谱得到确证。 关键词：兽药多残留；液相色谱-串联质谱；快速溶剂萃取；饲料 Abstract Residue of veterinary drug refers to prototype drug and its metabolic product , as well as the veterinary drug related impurities, which are accumulated and retained in the animal body or animal derived food, for example,eggs, milk, meat and so on. Its unit of measurement is ususlly ｕg/ml or ｕg/g. Antibiotics such as sulfonamides and fluoroquinolones are more easily lead to excessive veterinary drug residue in food of animal origin. At present, a combination of several veterinary drugs in low dose level for ―cocktail‖ kind of synergistic effects has appeared in animal husbandry. In this situatuion, detecting methods for single class of drugs are not ava