多基因联合检测指导晚期非小细胞肺癌辅助治疗的临床研究.docxVIP

多基因联合检测指导晩期非小细胞肺癌辅助治疗的临床研 究 尹志永1杨大勇1杨立丰2李 华3王铁军3陈丽娜1 1 .秦皇岛市第二医院胸外科 河北 昌黎 0 6 6 6 0 0 ; 2?秦皇岛市 第二医院神经外科 河北 昌黎 0 6 6 6 0 0;3.秦皇岛市第二医院检验科 河北昌黎 066600 【中图分类号】G 6 3 3?9 1 【文献标识码】A 【文章编号】1 0 08 — 63 1 5 ( 2 0 1 5 ) 1 2-0303-02 帅癌(carcinoma)是最常见的肿瘤目前已成为造成女性或者男性死亡的 首位癌症，其屮NSCLC最为常见,占所有肺癌的8 0 %以上?且7 0 %的NSCLC在 发现时已属晚期,失去手术及多学科综合治疗的机会?晚期NSCLC目前仍以联合 化疗为主,但由于肿瘤本身及不同病人Z间异质性，而且同一种病理类型和分期的 NSCLC对于同一种化疗方案的皱感性差异很大，却不可避免的经历了化疗的毒副 作用?其有效率只有2 0 %-4 0 %，屮位生存期8-10个月，五年生存率不到 1 5 %.因此八正确有效的使用化疗药物显得尤为重要.本研究通过对比分析以胸 水或静脉血屮ERCC 1、RRM 1、TYMS与TUBB 3表达量选择化疗方案与直接进 行顺钳、吉西他滨联合治疗两种化疗方法的临床疗效、生存期和不良反应发生情 况，探究ERCC 1、RRM 1、TYMS与TUBB 3检测在指导晚期NSCLC个体化治疗的 临床意义?1资料和方法 1?1 一般资料 随机选取我院2012年10月至2013年10月我 院胸外科住院治疗的晚期NSCLC患者6 8例，纳入标准为:①临床症状符合NSCLC 诊断标准;②经CT检查证实存在肿瘤病灶，均经气管镜活检或穿刺或胸水病理确 诊;③肿瘤分期属于【lib和IV期;④初诊且未经过治疗;⑤体力状况评分(ECOGPS评 分)小于3 (5分法)，且生存期大于3个月;排除感染性疾病、肝肾疾病、慢性心脏 病等疾病，以及合并其他系统疾病?随机将所有患者分为研究组和对照组两组，两 组间一般资料均无显著性意义（P 0?0 5 ）,具有可比性.所有研究对象及其家属 知晓本次研究内容并签署知情同意书. 1?2 ERCC 1、RRM 1、TYMS和TUBB 3基因表达检测 肿瘤相关基因 mRNA表达水平实时荧光定量PCR检测试剂盒为南京生兴生物公司产品?血液（液 体样本）总RNA快速提取试剂盒（离心柱型）、cDNA合成试剂盒、pGM-T载体 试剂盒均为Bioteke公司产品?在实验组患者入组后（未开展化疗）进行穿刺获得胸 水（4 0毫升）或抽取静脉血（1 0毫升）做为样本，按照试剂盒操作步骤首先进行总 RNA提取，通过琼脂凝胶电泳检测其纯度，并使用分光光度仪测得D 2 6 Onm/D 2 8 0 nm在1.7 — 2.1之间.然后按照cDNA合成试剂盒操作步骤进行cDNA 合成,将所得cDNA经PCR扩增后得到目的DNA?选用pGM-T载体试剂盒进行TA 克隆,所得质粒进行PCR鉴定,并测序鉴定所得产物序列的正确性.选用肿瘤相关基 因mRNA表达水平实时荧光定量PCR检测试剂盒，按操作步骤进行,将质粒标准品 及管家基因质粒标准品等比稀释成6个浓度后进行SYBR荧光实吋定量PCR检测, 反应条件:聚合酶的活化2 Os, 9 5 °C,PCR扩增4 0个循环?检测出质粒样本中 ERCC 1、RRM 1和TUBB 3基因的mRNA表达量，按照表达量的多少分为无表达、 低表达和高表达. 1?3 个体化化疗方案 研究组患者根据ERCC 1、RRM 1、TYMS和TUBB 3基因表达量确定化疗方案:ERCC 1基因低表达或无表达者采取以钳类为主的两 种药物治疗,RRM 1基因低表达或无表达者采取吉西他滨单药治疗或以吉西他滨 为主的两种药物治疗,TYMS低表达者采用培美曲塞二钠单药治疗,TUBB 3基因高 表达者需避免使用紫杉类化疗药物?研究组共计出现以下6类情况:ERCC 1和 RRM 1低表达或无表达，而TUBB 3基因高表达者6例，采取顺钳与吉西他滨共同 治疗;ERCC 1、RRM 1和TUBB 3基因均呈现低表达或无表达8例，采取顺钳与吉西 他滨共同治疗;ERCC 1和TUBB 3基因高表达，而RRM 1低表达或无表达5例，采取 吉西他滨单独治疗；ERCC 1和RRM 1高表达，而TUBB 3基因低表达者6例,采取多 西他赛单独治疗；ERCC 1和TUBB 3低表达，而RRM 1基因高表达者1 0例，采 取多西他赛与顺钳共同治疗?TYMS低表达者5例,采用培美曲塞二钠单药治疗?对 照组患者均采取顺钳与吉西他滨共同治疗?用药剂量根据体表面积给予常规治疗， 严重者可适当加量?用药期间患者若出现恶心、呕吐、出血等不