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复方补骨脂颗粒长期毒性探究 ［摘要］目的 研究复方补骨脂颗粒经口服给药途径的 长期毒性。 方法 以临床成人日用量的60、30、15倍连 续灌服3个月，停药2周，分别称量大鼠体重，计算脏器系 数，测定血液学和血液生化学指标，并做病理组织学检查。 结果复方补骨脂颗粒三组剂量大鼠均未出现中毒症状，大 鼠体质量、摄食、血液学、血液生化学和病理组织学等均未 见毒理学意义的异常改变。结论复方补骨脂颗粒口服长 期服用对大鼠无明显毒性反应，其无毒反应剂量为16 g/ (kg ? d),可推荐临床使用。 ［关键词］复方补骨脂颗粒；大鼠；长期毒性 ［中图分类号］R284. 1 ［文献标识码］A ［文章编号］ 1673-7210 (2012) 12 (c) -0025-03 复方补骨脂颗粒为治疗骨质疏松的临床经验方，由补骨 脂、知母、核桃仁、黄柏、延胡索、怀牛膝、砂仁、慧改仁 组成并对其合成工艺、质量标准、药效学等方面进行了较为 系统的研究［1-3］ o经临床验证，其具有良好的治疗骨质疏 松的作用。复方补骨脂颗粒的主要给药方式是口服，为进一 步了解复方补骨脂颗粒临床长期用药的安全性，参照《中药、 天然药物长期毒性研究技术指导原则》的相关规定［4］,进 行长期毒性试验。长期毒性试验可以观察连续反复给药时， 实验动物出现的毒性作用、剂量与毒性效应的关系、主要毒 性靶器官、毒性反应的性质和程度、毒性反应是否可逆等， 是临床前毒性评价的主要内容，是新药审评重点内容之一， 它为临床安全用药的剂量设计提供参考依据，为临床毒副作 用的监护及生理生化指标检测提供依据［5］。本实验以大鼠 为对象，观察大鼠首先出现的症状和严重程度、毒性反应的 靶器官及其恢复和发展情况，确定无毒剂量，为拟定人用安 全剂量提供实验依据。 1材料与方法 1药物 复方补骨脂颗粒，由本实验组将补骨脂等八种中草药经 煎制浓缩调制而成，批号：060215。 1.2动物 SD大鼠（二级），雌雄各半，体重90?100 g,由河北 省实验动物中心提供，许可证号为SCXK （冀）2003-l-003o 1.3试剂 丙氨酸氨基转换酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转换酶 （AST）、尿素氮（BUN）、肌酉干（CREA）、碱性磷酸酶（ALP）、 总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆固醇（CH0）、总胆红素 （BIL）、血糖（GLU）检测试剂分别由南京建成生物工程研 究所，首都医科大学首医临床医学科技中心、保定长城临床 试剂公司提供。 1.4试验方法[6] 将大鼠随机分成4组，每组20只，雌雄各半，每笼饲 养5只，分别为正常对照组，复方补骨脂颗粒小剂量组（4 g/kg,相当于临床用药的15倍），复方补骨脂颗粒中剂量组 （8 g/kg,相当于临床用药的30倍，）复方补骨脂颗粒大 剂量组（16 g/kg,相当于临床用药的60倍）。大剂量组大 鼠于每日上午8点、 鼠于每日上午8点、 下午4点灌胃给予浓度0. 8 g/mL的受 试物，中剂量组大鼠于每日上午8点、灌胃给予浓度0.8 g/mL的受试物，下午4点灌胃给予等容量蒸馄水，小剂量组 大鼠于每日上午8点灌胃给予浓度0.4 g/mL的受试物，下 午4点灌胃给予等容量蒸馆水；对照组大鼠于每日上午8点 灌胃给予等容量蒸馆水，容量均为1 mL/100g体重，每周 定时给药7 d,并称重1次，根据体重变化调整给药量，连 续3个月。末次给药后，动物禁食12 h （不禁水），各组活 杀10只大鼠，剩余10只大鼠作恢复期观察。试验周期为3 个月；恢复期为2周。 1. 5检测指标 从购入日到恢复期结束，每天2次观察动物的外观体征、 行为活动、二便情况；给药期间以及恢复期每周称1次体质 量，测1次进水进食量；给药结束和恢复期结束各检测1次 血液学及血液生化学，各组分别取一半动物的主要脏器进行 肉眼观察、病理检查并计算脏器系数[7-8] o 6统计学方法 采用SPSS 14.0进行统计学分析，计量资料数据以均 数土标准差(x±s)表示，采用方差分析，两两比较采用LSD-t 检验。计数资料以率表示，采用x2检验。以P 0. 05)； 复方补骨脂颗粒(4、8、16 g/kg)连续12周灌胃给药对 大鼠体重均无明显影响(P 0. 05)o见表1、2。 3对大鼠血液学指标的影响 结果显示，各组大鼠外周血红细胞数、血红蛋白、血小 板数、白细胞数及分类、凝血时间差异均无统计学意义(P 0. 05),说明三个剂量组对大鼠的各项血液学指标均无明显 影响。见表3。 2.5对大鼠主要脏器系数的影响 结果显示，各组大鼠脏器系数差异均无统计学意义 (P 0. 05)o表明，复方补骨脂颗粒三个剂量组对大鼠 的各主要脏器系数均无明显影响。见表5。 2.6病理组织学检查 随机抽取各组1/2动物对其重要脏器进行病