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复方地龙胶囊对哮喘小鼠血清IL-13的作用 崔素华1、2 丁伯平1黄维琳2唐国华3 ( 1皖南医学院药理教研室安徽芜 湖241000)(2安徽中医药高等专科学校安徽芜湖24 1000)(3芜湖市第 一人民医院安徽芜湖241000 ) 【摘要】目的探讨复方地龙胶囊对哮喘小鼠血清白细胞介素-13CIL-13)的作用， 从分子水平研究其治疗哮喘的可能机制。方法 釆用卵白蛋白腹腔注射致敏建立 小鼠支气管哮喘模型，用复方地龙胶囊、地塞米松与牛理盐水对小鼠进行干预， 用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素(I L-13)的表达水平。 结果 哮喘模型组小鼠血清ILJ3含量显著高于正常对照组(Plt;0.01);复方地 龙胶囊各剂量组及地塞米松组ILJ3含量水平均明显低于哮喘模型组(Plt;0.05)； 复方地龙胶囊各剂量组与地塞米松组比较，差异不显著(Pgt;0.05)o结论复方 地龙胶囊可能通过影响哮喘小鼠血清IL-13的水平，调节免疫系统产牛治疗作用。 【关键词】复方地龙胶囊 哮喘IL-13 支气管哮喘是由多种细胞包括气道的炎性细胞和结构细胞(如嗜酸粒细 胞、肥大细胞、T淋巴细胞、中性粒细胞、平滑肌细胞、气道上皮细胞等)和细 胞组分参与的气道慢性炎症性疾病［1］。流行病学研究表明，哮喘的发病率和病 死率具有全球性上升的趋势［2］。据世界卫生组织估计，全球大约有3亿哮喘患 者。防治哮喘己成为全球公共卫牛问题。 哮喘的主要特征是气道嗜酸性粒细胞浸润、支气管痉挛和气道高反应。 免疫反应在哮喘的发病机制中占有重要地位。根据细胞因子分泌及效应功能的不 同，抗原特异性CD4+T细胞分为1型辅助性T淋巴细胞(Thl)和2型辅助性T 淋巴细胞(Th2)两类。现研究认为哮喘发病的重要基础是Thl / Th2细胞类细胞 因子比例和功能失衡［3］。Thl和Th2细胞之间处于相互抑制状态，两者形成复杂 有序的细胞因子网络，调节正常的免疫应答。正常情况下，两者处于一种平衡状 态。Th细胞中的Thl/Th2平衡失调，T h2细胞数目增多及功能亢进是哮喘发 病的重要基础之一［4］。哮喘时浸润至气道的主要为Th2细胞,T hl细胞相对较少； 由T h2细胞所产生的Th2类细胞因子I L?5、IL-13等在哮喘气道表达的mR N A及 蛋白水平均过度增高;Th I类细胞因子如I FN-r相对不足o IFN-r和I L?5、IL-13 分别是Th I和Th2免疫反应的代表性细胞因子，体现着Th I和T h2细胞的主要 生物学效应。2类细胞因子11_?5、IL-13等产生增多，而Thl类细胞因子IFN?r 等产生减少，从而导致B细胞合成增多、嗜酸性粒细胞活化浸润气道及气道高反 应性。因此调节Thl/Th2平衡对哮喘的治疗具有重要意义，促进ThO细胞向T h I细胞分化，抑制Th2型细胞因子的产生，调节Thl / Th2的反应失衡可能用于防 治哮喘。由于Th2细胞因子在哮喘等过敏性炎症的发生发展中起的重要作用，以 此为靶点的研究是目前哮喘治疗研究中的热点［5-8］ o 1材料与方法 1.1实验对象 48只清洁级健康小鼠，体重30plusmn;2g,雌雄各半，购自南京青龙 山实验动物中心。 1.2主要仪器 全自动电子雾化器（南京道芬电子仪器厂），80?2型离心机（上海手术 机械厂），微量移液器（上海求精玻璃仪器厂），电热恒温水箱（上海医用恒温设 备厂），酶标仪（美国Costar公司）。 1.3主要试剂 卵白蛋白（合肥博美生物科技有限责任公司）、复方地龙胶囊（南京恒 生制药厂,批号:Z199991007）＞小鼠白细胞介素13定量检测试剂盒（ELISA）（深 圳晶美生物公司）。 1.4动物分组 48只小鼠随机分为6组，每组8只。A组为空白对照组，B组为哮喘模 型组，C组为复方地龙胶囊高剂量组（0.9mg/g/d）, D组为复方地龙胶囊中剂量组 （0.6mg/g/d）, E组为复方地龙胶囊低剂量组（0.3mg/g/d）, F组为地塞米松激素治 疗组（1.5mg/kg/d）o 1.5建立模型 采用鸡卵清蛋白(OVA)腹腔注射及雾化吸入方法制造小鼠哮喘模型。 小鼠适应性饲养一周，空白对照组以生理盐水致敏和引喘，其余各组于dl、8 天分别腹腔注射含10%OVA100ug.明矶2m g混悬液0.3ml致敏，两周后小鼠 逐个放入体积约5L的透明密闭容器中，雾化吸入1%OVA (200mgOVA溶于生理 盐水20 ml ) 20分钟，连续7天，小鼠出现明显腹肌收缩、鼻部潮湿、喷嚏、 紫纟甘、烦躁、激惹等呼吸道症状，证明激发成功。 1.6治疗方法 空白对照组、哮喘模型组在每次激发前lh以生理盐水灌胃，地塞米松 组在每次激发前lh腹腔注射1.5m g/kg地塞米松注射液，复方地龙胶囊