CLH2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体.ppt

① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ ⑧ ⑨ ⑩ 11 这些颜色分别用来表示什么 为何一次融合操作有这么多种融合细胞？ 该过程的最后产品是什么？ 科学家的单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 注意观察细胞的种类 复习回忆：1.植物体细胞杂交技术的过程是怎的？2.动植物细胞在结构上有何区别？ 阅读课本P52，思考： 动物细胞融合的基本原理与植物原生质体 融合的基本原理是否相同？ 1、全国大纲卷 （考试地区：广西） 2、新课标全国卷（I） （河南、河北、山西、陕西、湖北、江西、湖南）3、新课标全国卷（II） （青海、西藏、甘肃、贵州、吉林、宁夏、内蒙古、黑龙江、新疆、云南、辽宁）  厦门六中 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 (1) (1) (2) (3) (4) (5) 植物体细胞杂交过程示意图 思考题 1.植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？ 酶解法，如纤维素酶、果胶酶 2.动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？ 不需要，因为动物细胞没有细胞壁 3.植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？ 离心、振动、电激等物理方法；PEG等化学方法 4.动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？ 能 还可以利用灭活的病毒进行诱导 5.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形成完整的杂种个体，你认为动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？ 不能 动物细胞A 动物细胞B 灭活病毒、PEG、电激等诱导 融合后的细胞进行有丝分裂 一、动物细胞融合 杂交细胞 两个杂交细胞 1、 动物细胞融合的过程----流程图 方法？ 原理？ 几种？ 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程。 一、动物细胞融合 融合后形成的单核细胞称为杂交细胞。 2、 动物融合的概念 植物体细胞杂交 动物细胞融合 植物体细胞杂交与动物细胞 融合异同 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振动、电激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 一、动物细胞融合 3、细胞融合的意义 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，为制造单克隆抗体开辟了新途径。 4、应用： 研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段.特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体。 提 问 ？ 1.抗体是由何种细胞产生的？ 效应B细胞（浆细胞）。 2.一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗体吗？ 每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 3.抗原侵入机体之后，引起机体免疫反应产生的抗体只有一种吗？ 动物在免疫反应过程中，体内产生的特异性抗体种类可多达百万种以上。 二、单克隆抗体 1、什么是抗体？抗体是如何产生的？ 二、单克隆抗体 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 抗原 动物体 刺激 效应B 细胞 抗体 动物接触的抗原不只1种 抗体不纯 缺陷：特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏 2.人类获得抗体的方法(传统方法) 分离抗体 体内产生的抗体多达百万种 一个效应B细胞只能产生一种特异性抗体 设想一: 筛选单一效应B细胞 二、单克隆抗体 单个B淋巴细胞 细胞群 有丝分裂 克隆 设想一: 选出一个制造一种专一抗体的效应B细胞 进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成的细胞群，即单克隆。 单克隆细胞(群)将合成针对一种抗原的抗体，称为单克隆抗体。 筛选单一效应B细胞 在体外不能增值! 效应B细胞 困难: ？？？ 无法克隆! 设计： “既能大量增殖又能产生足够数量特异性强的抗体的细胞。” 二、单克隆抗体 设想二: 诱导融合 选择性培养基 筛选，继续培养 克隆能产生抗体的阳性细胞 体外培养或小鼠腹腔内增殖 动物细胞融合 动物细胞培养 二、单克隆抗体 注射特定的抗原蛋白 免疫小鼠 免疫的B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 杂交细胞 杂交细胞（ B-瘤细胞） 单克隆抗体 杂交瘤细胞 瘤-瘤细胞 B-瘤细胞 B-B细胞 第一次筛选出杂交瘤细胞 第二次筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞 3.单克隆抗体制备过程 二、单克隆抗体 (1）怎样对小鼠进行免疫？ (2)图中的B淋巴细胞有何功能？骨髓瘤细胞有何功