乳与乳制品非常规理化指标检验奶酪的检测.doc

乳与乳制品非常规理化指标检验奶酪的检测 YLNB 5.5 一．脂肪的测定： 依据： IDF5:2004(E)。 范围：酪蛋白含量较高的奶酪制品。 试剂： 3.1盐酸溶液：质量分数约25%，即将浓度为37%的浓盐酸675ml加水稀释至1000ml,摇匀，此溶液要求保证盐酸的浓度。 3.2乙醇或由甲醇变性的乙醇：体积分数至少为94%。 3.3乙醚：不含过氧化物，不含抗氧化剂，或抗氧化剂含量不大于2mg/kg，并满足空白试验的要求。 3.4 石油醚：沸程30-60℃。 3.5 混合溶剂：等体积混合乙醚（3.3）和石油醚（3.4），使用前配制。 4.设备： 4.1 离心机：可安放脂肪抽提瓶，转速为500-600r/min，可在抽脂瓶外端产生80—90g的重力场。 4.2蒸馏器或蒸发器：可在不超过100℃情况下，蒸馏除掉脂肪收集瓶中的溶剂和乙醇. 4 .3烘箱：温度可控制在102±2℃。 4.4水浴：温度可控制在65℃±5℃。 4.5毛氏抽脂瓶：抽脂瓶应带有适当的优质软木塞或其他不影响溶剂使用的瓶塞（如硅胶或聚四氟乙烯）。软木塞应先浸于乙醚中，后放入60℃或60℃以上的水中保持至少15min，然后在水中冷却，使用时木塞已饱和，不用时要一直浸泡在水中，浸泡用水每天更换一次。 4.6 支架：放置抽脂瓶。 4.7 洗瓶：适合装混合溶剂,不能使用塑料洗瓶。 4.8脂肪收集瓶：例如：容量为100-250ml可加热三角瓶（平底烧瓶）， 4.9 沸石：无脂肪、无气孔的瓷片或碳化硅或玻璃珠（用金属皿的情况下）。 4.10 量筒：5ml和25ml。 4.11吸量管：10ml刻度吸管。 4.12 金属夹钳：用于夹烧瓶、烧杯和皿。 4.13 毛氏抽脂瓶摇混器：可夹放毛氏抽脂瓶，摆动频率为100±10次/min。 5 操作步骤 5.1 脂肪收集瓶的准备 在干燥的脂肪收集瓶中加入几粒沸石，放入烘箱中干燥1h。使收集瓶冷却（防尘）至天平室的温度（玻璃收集瓶至少需要1h，金属皿至少0.5h）。收集瓶不可放入干燥器中，避免冷却不充分或冷却时间过长。 5.2样品操作: 5.2.1称取1g样品于抽脂瓶中,加入8-9ml的25%的盐酸，在沸水浴中加热溶解20-30分或在电热板上加热10分钟，直到溶解，时而振荡一次，取出，用水冷却至室温。同时作空白，在抽脂瓶中不加样品，只加入10mL25%盐酸，其他操作同样品检测。 5.2．2加入10mL乙醇，轻轻地使内容物在小球和柱体间来回流动，彻底地进行混合，避免太接近瓶颈。 5.2.3加入25mL乙醚，塞上被水饱和的软木塞，或用水浸湿的其他瓶塞，将抽脂瓶保持在水平位置，小球的延伸部分朝上夹在摇混器上，按约100次/min振荡烧瓶1min，不要过度（避免形成持久乳化液）。必要时将抽脂瓶放在流水中冷却，然后小心地打开塞子，用少量的混合溶剂冲洗塞子和瓶颈 冲洗时使用洗瓶，使冲洗液流入抽脂瓶或已准备好的脂肪收集瓶中。 注：如没有摇混器，可用手进行振荡。 5.2.4 加入25mL石油醚，塞上重新润湿的塞子（浸入水中），接5.2.3所述，轻轻振荡30s。 5.2.5.将加塞的抽脂瓶放入离心机中，在500-600r/min下离心5min。如果没有离心机，则将抽脂瓶放到支架上，静止至少30min，直到上层液澄清，并明显与水相分离。必要时，放在流水中冷却抽脂瓶。 5.2.6 小心地打开软木塞或瓶塞，用少量的混合溶剂冲洗塞子和瓶颈内壁，使冲洗液流入抽脂瓶或脂肪收集瓶中。 如果两相界面低于小球与瓶身相接处，向抽脂瓶壁边缘慢慢地加入水，使液面高于小球和瓶身相接处，以便于倾倒。 5.2.7 手持抽脂瓶的小球部，小心地将上层液尽可能地倒入已准备好的含有沸石的脂肪收集瓶中，避免倒出水层。 5.2.8 用少量混合溶剂冲洗瓶颈外部，冲洗液收集在脂肪收集瓶中。小心操作，以防溶剂溅到抽脂瓶的外面。 按上所述，采用蒸馏或蒸发的方法，去除脂肪收集瓶中的溶剂或部分溶剂。 5.2.9 重复操作，进行第二次抽提，不加乙醇，只用15mL乙醚和15mL石油醚，用混合溶剂冲洗瓶颈内壁。 5.2.10 重复操作，进行第三次抽提，只用15mL乙醚（3.5）和15mL石油醚，用混合溶剂，冲洗瓶颈内壁。 5.2.11采用蒸馏的方法去除收集瓶中的溶剂，蒸馏前用少量混合溶剂冲洗瓶颈内部。 5.2.12 将脂肪收集瓶放入102℃±2℃的烘箱（4.3）中加热1h，取出收集瓶，冷却至天平室的温度（不要放入干燥器中，但要放防尘，玻璃容器冷却至少1h，金属容器冷却至少0.5h）。称量，精确至0.1mg。称量前不要擦收集瓶。用夹钳将收集瓶放到天平上（避免温度变化）。 5.2.13 重复操作，直到脂肪收