乳与乳制品常规理化指标检验脂肪的检测.doc

乳与乳制品常规理化指标检验脂肪的检测 YLNB 2.6 1. 范围 本方法规定了脂肪测定的基准方法。 本方法适用于乳粉、液体奶、婴儿配方食品、炼乳、稀奶油和奶油、冰淇淋样品中脂肪的测定。 2. 原理 样品用浓氨水和乙醇处理，氨水使酪蛋白钙盐变成可溶解的盐，促进脂肪球和乙醚的作用；加入乙醇使一系列的能被酒精浸出的物质留在水相中。然后利用乙醚提取试样中脂肪。加入石油醚使乙醚不被水饱和，并使分层清晰。将醚层倒入脂肪收集瓶中后使乙醚和石油醚挥发掉，就可得到剩在收集瓶中的脂肪的重量。 3. 试剂 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯；所用实验用水，如未注注明其他要求，均指三级水。 按5.4规定的步骤进行空白试验，检验试剂的纯度。按5.1的操作准备一空的脂肪收集瓶用来校正环境的影响。试剂残余物含量不得大于0.5mg（见8.1）。 如果全部试剂空白残余物大于0.5mg，则分别蒸馏100ml乙醚和石油醚，测定溶剂残余物的含量。用空的控制瓶测得的量和每种溶剂的残余物的含量都不应超过0.5mg。若超过0.5mg，则应更换不合格的试剂，或对试剂进行提纯。 3.1 淀粉酶 3.2 氨溶液：质量分数约25%，ρ20约910g/L。 注：如果买不到此浓度的氨溶液，可使用已知的、更大浓度的氨溶液。 3.3 乙醇或由甲醇变性的乙醇：体积分数至少为94%（8.5）。 3.4 刚果红溶液：1g刚果红溶于水中，稀释至100mL。 注：可选择性地使用。刚果红溶液可使溶剂和水相界面清晰（见5.5.4），也可使用其他能使水相染色而不影响测定结果的溶液。 3.5 乙醚：不含过氧化物（见8.3），不含抗氧化剂，或抗氧化剂含量不大于2mg/kg，并满足空白试验的要求（见8.1和8.4） 3.6 石油醚：沸程30-60℃。 3.7 混合溶剂：等体积混合乙醚（3.5）和石油醚（3.6），使用前配制。 3.8 氯化钠溶液：20g/L,将20g 氯化钠溶于水中，稀释至1000mL。 4. 仪器及器材 由于测定中使用了挥发性可燃溶剂，所有电器的使用均按照这些溶剂使用的有关规定进行。 4.1 分析天平 4.2 离心机：可安放脂肪瓶或管（4.6）转速为500-600r/min，可在抽脂瓶外端产生80-90g的重力场。 注：可选择性使用 4.3蒸馏器或蒸发器：可在不超过100℃情况下，蒸馏除掉脂肪收集瓶中的溶剂和乙醇，或蒸发除掉烧杯或平皿中的溶剂和乙醇（5.5.7，5.5.11）。 4.4 烘箱：温度可控制在102±2℃。 4.5 水浴：温度可控制在65℃±5℃。 4.6 毛氏抽脂瓶：抽脂瓶应带有适当的优质软木塞或其他不影响溶剂使用的瓶塞（如硅胶或聚四氟乙烯）。软木塞应先浸于乙醚中（3.5），后放入60或60℃以上的水中保持至少15min，然后在水中冷却，使用时木塞已饱和，不用时要一直浸泡在水中，浸泡用水每天更换一次。 4.7 支架：放置抽脂瓶。 4.8 洗瓶：适合装混合溶剂（3.7）。不能使用塑料洗瓶。 4.9 脂肪收集瓶：例如：容量为125-250ml可加热烧瓶（平底烧瓶），150ml锥形瓶或金属皿。若使用金属皿，最好为不锈钢、平底、有溢流口的、直径为80-100mm，高约50mm。 4.10 沸石：无脂肪、无气孔的瓷片或碳化硅或玻璃珠（用金属皿的情况下）。 4.11 量筒：5ml和25ml。 4.12 吸量管：10ml刻度吸管。 4.13 金属夹钳：用于夹烧瓶、烧杯和皿。 4.14 毛氏抽脂瓶摇混器：可夹放毛氏抽脂瓶，摆动频率为100±10次/min。 5. 方法 5.1 脂肪收集瓶的准备 于干燥的脂肪收集瓶（4.9）中加入几粒沸石（4.10），放入烘箱（4.4）中干燥1h。使收集瓶冷却（防尘）至天平室的温度（玻璃收集瓶至少需要1h，金属皿至少0.5h）。 注：1.去除溶剂过程中，特别是使用玻璃收集瓶时，沸石可以使沸腾均匀。用金属皿时，也可选择地使用沸石。 2 .收集瓶不可放入干燥器中，避免冷却不充分或冷却时间过长。 5.2 样品的制备 反复转动样品容器，使样品充分混合（必要时，将实验样品全部移入大的密闭容器中之后，再进行此操作）。 5.3 样品的称取和抽提准备 5.3.1 鲜乳，液体乳，脱脂乳等液体样品 5.3.1.1 用10ml或10.75ml吸管将样品移入小烧杯中，置于分析天平上用减量法称取10-11g，准确至0.1mg，移入毛氏抽脂瓶。 5.3.1.2 加入2ml氨溶液（3.2）或同体积的浓氨溶液（见3.2注），在小球中与样品充分混合。加入氨水后，应马上进行下一步骤。 5.3.2 粉类样品 5.3.2.1 轻轻搅拌或转动样品容器，以便混合实验样品（5.1），立即取样，直接放在抽脂瓶（4.6）或其他容器中