交叉配血标准操作规程.doc

交叉配血标准操作规程 (一)检验目的 检测供血者与受血者之间的输血相容性，包括主侧配血与次侧配血，确保输血安全。 (二)检验原理 1.凝聚胺法 利用多聚季胺盐类——凝聚胺携带很多正电荷，中和红细胞表面的负电荷，使红细胞之间距离减少，引起正常红细胞可逆性凝集。无抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，当加入中和液后，则凝集消散，而抗体致敏的红细胞被凝聚胺凝集，则不能消散，以此来判断供、受者间血液的相容性。 2.微柱凝胶法 微柱凝胶卡的微管中装填有葡聚糖凝胶颗粒和抗人球蛋白试剂，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，凝胶颗粒具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过凝胶颗粒，使其悬浮在凝胶上端，未凝集的红细胞则可以通过凝胶颗粒到达微管底部。 3.玻璃珠微柱法 微柱卡的每一个微管中装填有直径均一的玻璃微珠和抗人球蛋白试剂(抗-IgG和抗补体C3)，红细胞表面抗原与其对应的IgG抗体结合以后，在离心力的作用下不断向管底沉降，并与抗人球蛋白结合形成红细胞凝集，玻璃微珠具有分子筛的作用，可以阻滞凝集的红细胞在离心力的作用下通过玻璃微珠，使其悬浮在玻璃微珠层的上端，未凝集的红细胞则可以通过玻璃微珠之间的微小空隙到达微管底部。 (三)适用范围 适用于手工凝聚胺法、全自动微柱凝胶法、全自动玻璃珠微柱法交叉配血试验。 (四)设备性能参数 各种交叉配血检测系统性能指标参见相应检测系统说明书。 (五)器材与试剂 1.器材 KA-2200血清学专用离心机、B600-A型低速离心机、WADiana全自动血型配血系统、SWING-SAXO血型配血系统、Techno全自动血型配血系统、Othro Au-toVuelnnova全自动血型及配血系统、阅片灯箱、光学显微镜、塑料软试管、塑料硬质试管(100mm×l2mm和75mm×l2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。 2.试剂 DianaDGGelCoombs卡、DlaMed Coombs卡、Othro BioVue Coombs卡、生理盐水、凝聚胺配套试剂(LIM液、Re-suspending液、Polybrene液)、专用稀释液(DIL2、DGGELsol或BLISS液)。 (六)标本要求 1.患者样本 EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血，全血量3～5ml，在1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血、无凝块、无明显乳糜。紧急情况下可以使用抗凝动脉血。 2.供者标本 枸橼酸盐抗凝全血，全血量3-5ml，在1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血、无凝块及明显乳糜。 (七)校准步骤 各类全自动血型检测系统的校准操作过程分别见《WADiana全自动血型配血系统标准操作规程》《SWING-SAXO血型配血系统标准操作规程》《Techno全自动血型配血系统标准操作规程》《强生Othro AutoVue ln-nova全自动血型配血系统标准操作规程》。 (八)操作程序 1.凝聚胺法交叉配血操作程序 (1)取洁净硬质试管2支，标明主、次侧，主侧管加入受血者血清(血浆)2滴，供血者3％红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴，次侧管加供血者血清2滴，受血者3％红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴。 (2)各试管分别加LIM液0.65ml，充分混合均匀后，再各加Polybrene溶液2滴，并混合均匀。 (3)使用血型血清学专用离心机在1 000g条件下，离心15秒，把上清液倒掉，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。 (4)轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集，则必须重做以上步骤。 (5)最后加入Resuspending液2滴，轻轻转动试管并同时观察结果。如果在30秒至1分钟凝集散开，代表是由Polybrene引起的非特异性聚集，配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如反应可疑，可进一步将细胞悬液涂在玻片上用显微镜观察。 2.AutoVue lnnova全自动交又配血操作程序 参照《Othro AutoVue lnnova全自动血型配血系统标准操作规程》进行。 3.检验结果的输入与确认 (1)启动“检验程序”，输入用户名及口令后，进入检验程序。 (2)非传输结果及镜检结果的输入：单击“检验”菜单，选择“检验结果录入／修改”，通过申请序号进行检验结果的录入及修改。 (3)检验结果的确认：检验结果应由实验室负责人或授权人员进行确认，方法为