文心兰RFNR的克隆亚细胞定位及其与LFNR不同的胁迫.pdf

园艺学报，2018 ，45 (11) ：2164 –2176. Acta Horticulturae Sinica 2164 doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2018-0361；http ：//www. ahs. ac. cn 文心兰RFNR 的克隆、亚细胞定位及其与LFNR 不同的胁迫响应机制研究 1 1 1 1 1 1 1,* 李 蓉 ，吴晓佩 ，王雪晶 ，陈裕坤 ，郭容芳 ，林玉玲 ，赖钟雄 ， 徐 涵1,2,* 1 2 （福建农林大学园艺植物生物工程研究所，福州 350002 ； 法国图卢兹综合科学研究所（IRIT-ARI ），法国 31300 ） 摘 要：以‘小樱桃’文心兰为材料克隆了铁氧还蛋白氧化还原酶（FNR ）两种类型基因 RFNR （Root-type Ferredoxin-NADP+ + oxidoreductase ）和LFNR （Leaf-type Ferredoxin-NADP oxidoreductase ）。生 物信息学分析表明，RFNR 与 LFNR 都属于 FNR-like 超家族，具有黄素腺嘌呤二核苷酸（flavin adenine dinucleotide，FAD ）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide ，NAD ）功能结合域，在 进化过程中比较保守；两种类型的 FNR 在氨基酸组成、蛋白结构和构型方面存在明显差异，RFNR 比LFNR 有更强的保守性。FNR 蛋白亚细胞定位结果表明文心兰 FNR 蛋白都定位于叶绿体。实时荧光定量 PCR 分析表明，LFNR 和 RFNR 具有器官表达特异性：LFNR 更多地在叶中表达，RFNR 更多地在根中表达； 在软腐病胁迫下 LFNR 下调响应，RFNR 上调响应；两种类型的 FNR 在盐胁迫以及高温胁迫处理时上调 响应，但RFNR 响应较快且强度更大；LFNR 和 RFNR 在水杨酸（salicylic acid，SA）处理时轻微波动， 茉莉酸甲酯（methyl jasmonate ，MeJA ）处理时呈现单峰反应。文心兰两种类型的FNR 基因在不同类型的 胁迫中显示相似的和有区别的表达特性，表明其具有不同的胁迫响应分子机理。 关键词：文心兰；铁氧还蛋白氧化还原酶；胁迫；亚细胞定位；基因表达 中图分类号：S 682.3 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2018 ）11-2164-13 Cloning and Subcellular Localization of RFNR and the Mechanisms of Stress Induced Response of RFNR and LFNR in Oncidium 1 1 1 1 1 1 LI Rong ，WU Xiaopei ，WANG Xuejing ，CHEN Yukun