国家标准GB_出口食品中产气荚膜梭状芽孢杆菌检验方法.pdfVIP

SE\II 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 sv 0177一92 出口食品中产气荚膜梭状芽抱杆菌 检 验 方 法 Methodfordetectionofclostridium perfringens infoodforexport 1992一12一28发布 1993一05一01实施 中华人民共和国国家进出口商品检验局 发布 中华人民共和国进出口商品检验行业标淮 出口食品中产气英膜梭状芽抱杆菌 SN 0177一92 检 验 方 法 代替 ZBX09007一86 Methodfordetectionorclostridium perfringens infoodforexport 1 主题内容与适用范围 本标准规定了出口食品中产气荚膜梭状芽抱杆菌的检验方法 本标准适用于出口食品的检验 2 设备和材料 2.1 吸管 1.0ml-和 10。mL.分别具有。.1mL和 1.0mL刻度。 2,2 菌落计数器。 2.3 均质器 2.4 厌氧培养装置 2.5 超低温冰箱 2.6 恒温培养箱 36士1C 2.7 恒温水浴箱:16士1C 2.8 培养皿:90或100mm. 2.9 显微镜。 3 培养基和试 剂 11 胰所一亚硫酸盐一环丝氨酸(TSC)琼脂。 3.2 D一环丝氨酸溶液 3.3 卵黄乳液。 34 缓冲动力一硝酸盐培养基。 3.5 乳糖一明胶培养基 I6 产芽袍肉汤。 3.7 多价蛋白陈一酵母膏(PY)to养基 3.8 硫乙醉酸盐液体培养基。 3.9 蛋白陈水。 3.10 亚硝酸盐试剂。 3门1 缓冲甘油一氯化钠溶液。 4 样品制备 4.1样品的贮存和运送 _ _ _ __ __ 中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准 1993-05-01实旅 SN 0177一92 如不能立即进行检验时，应在样品中加等量缓冲甘油一A化钠溶液(液体食品应加双料的)斗竿样品 作低温保存.直到检验。运送祥品时.应使样品保持冷冻状态 并要避免容器破损 4.2 制样 将样品解冻.取25x移入灭菌均质杯，加225nil,蛋白陈水 以13000r/min均质2min.如为4i1本 祥品.则取样25mL，加入盛有225mL稀释剂的500mL稀释瓶中.摇匀.吸取此 1:10样品匀液10nli 加于90ml蛋白陈水中，摇匀，制成工:100样品稀释液 必要时.按此法将样品作进 一步的川f用玉增 稀释如·从10一 10- 检验 5.1 平板计数法 倾注不含卵黄的TSC琼脂到刊个灭菌平皿中 每皿约5ml..并迅速旋转平皿 使琼脂捕平J当琼 脂凝固后.将梅个平皿编号标记 以无菌操作，吸取稀释液样品1ml分别加到耳个到帐〔平板表而中心 再向平皿中倾注不含卵黄的TSC琼脂巧ml，缓慢地旋转平皿.使其与接种物混合均匀。 也可用灭菌I形玻璃棒，将0.1ml样品稀释液均匀地涂布于含卵黄乳液的TSCf,,,:脂址.将平板 水平静仪5-10min，使接种物被吸收。然后用不含卵黄的丁SC琼脂 10m工赶盖平板表误(含卵黄的 TSC琼脂最适于同时含有其他还原亚硫酸盐梭状芽抱杆菌的食品)。琼脂凝固后.将平板正羚于厌氧罐 内，于36士1C培养。不含卵黄的TSC琼脂平板培养20h，含卵黄的TSC琼脂平板培养24h.取出平板. 用肉眼观察生长士氰兄和有无黑色菌落。挑选生长有20^-200个黑色菌落的平板.用菌落计数器将黑色菌 落计数并计v每克食品中产气英膜梭状芽泡杆菌数。产气荚膜梭菌的菌落在含卵黄的培养基上呈