国家标准GB_出口食品中蜡样芽孢杆菌检验方法.pdfVIP

SIN 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 sN 0176一92 出口食品中蜡样芽抱杆菌 检 验 方 法 M ethodfordetection ofbacilluscereus infoodforexport 1992一12一28发布 1993一05一01实施 中华人民共和国国家进出口商品检验局.发布 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出 口食品中蜡样芽抱杆菌 SIN0176一92 检 验 方 法 代替ZBX09006-86 Methodfordetectionofbacillus cereusinfoodforexport 主题内容与适用范围 本标准规定了出口食品中蜡样芽袍杆菌的检验方法。 本标准适用于出口食品的检验。 2 设备和材料 2.1 吸管:容量 1.0mL和10.0mL，具0.1mL刻度。 2.2 菌落计数器。 2.3 均质器。 2.4 厌氧培养装置。 2.5 涡动搅拌器。 2.6 L形玻璃棒。 2.7 恒温培养箱:30C及36士1C。 3 培养基和试剂 3 . 1 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂(MYP), 2 3 胰酪膝大豆多枯菌素肉汤。 3 3 酚红葡萄糖肉汤。 4 3 硝酸盐肉汤。 3 5 营养琼脂。 刘 L-酪氨酸营养琼脂 3 7 溶菌酶营养肉汤。 ， O ︺ ， U 改良V-P培养基。 月 n d 吃 月 户 动力培养基。 八 气 六 J 川 . ︺ 胰酪陈大豆羊血琼脂(TSSB), ， ， J l J . . Butterfield氏磷酸盐缓冲稀释液。 ﹃ 气 勺 J 产 . ﹄ 亚硝酸盐试剂。 口 月 ﹃ . J J . V-P试剂。 0 弓 月 . 月 . t . 碱性复红染色液。 中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准 1993一05一01实施 SN 0176一92 4 样品的保存和送检 子 待检样品应保持在6℃以下运送并尽可能不使其冷冻。送达实验室后，应保存于4℃并尽快进行检 验。如在4d内不能进行检验，应将样品储存在一20℃，检验前再于室温下解冻。 脱水食品可在常温下送检和储存。 5 样品的制备 5.1以无菌操作用灭菌刀、剪将样品剪碎。称取50g放于无菌均质杯中。 5.2 加450mL无菌磷酸盐缓冲稀释液于均质杯中以18000^20000r/min均质2min。制成1e10样 品稀释液。 5.3 取 1:10稀释液 10.0mL加到含有90.0mL无菌磷酸盐缓冲液的稀释瓶中，充分混匀制成 1:100的稀释液。 5.4 每个稀释度换用 1支10.0mL灭菌吸管，按上述操作程序进行 10倍递增稀释直至 10-% 6 检验步骤 6.1 平板计数法 6.1.1 取各稀释液。.1mL接种到MYP琼脂平板上。用灭菌L形玻璃棒均匀涂布于整个琼脂表面。每 稀释度接种两个MYP琼脂平板。 6.1.2 将平板置于30C培养24h, 6.1.3 选取具有15-150个典型或可疑蜡样芽抱杆菌菌落的平板，进行计数。并计算同一稀释度两个