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实验五 果蝇唾腺染色体的观察 1 、学习果蝇幼虫唾腺的剖取方法和唾腺染色 体的制片方法; 2 、观察果蝇唾腺染色体的形态特征。 一、实验目的 双翅目昆虫(果蝇等)幼虫期唾腺细胞 中具有相当于普通染色体 100 - 150 倍的巨大 染色体,由于存在于唾液腺细胞中,所以称为 唾腺染色体 (salivary gland chromosome) 。 它是由于唾腺细胞发育到一定阶段后就不再进 行有丝分裂,永久停留在间期,唾腺染色体经 过多次复制而不分开,约有 1000 - 4000 根染 色体丝的拷贝,所以又叫多线染色体 ( polytene chromosomes )。 二、实验原理 黑腹果蝇巨大的唾腺染色体是 从染色中心向四周放射状地伸出 5 长 1 短共 6 条臂。果蝇染色体数为 2n = 8 。其中 1 号染色体( X 染色体) 为端着丝粒染色体,其着丝粒附着 地一端在染色中心上,另一端游离; 2 号、 3 号染色体为中部着丝粒染色 体,每条呈“ V“ 伸展两臂, 4 号染 色体很短小,呈点状附在染色中心 边缘。 特征 ? 巨大; ? 体细胞配对,染色体只有半数( n ); ? 各染色体的异染色质多的着丝粒部分互 相靠拢形成染色中心; ? 深浅不同、疏密个别的横纹。 染色质丝的不同部位螺旋化程度 不同,其中螺旋化程度较高的部位形 成染色粒,这些染色粒经多线染色体 的“放大”,形成染色较深的横纹。 横纹的相对大小和空间排列是恒定的, 可以作为天然的精确基因定位的“坐 标”。这些横纹的数目和位置一般是 恒定的,具有果蝇种的特征,染色体 的缺失、重复、倒位、易位等,都能 在唾腺染色体上辨别出来。 banded chromosomes 1000x 材料:果蝇的三龄幼虫 试剂: 1% 醋酸洋红 器具:显微镜、镊子、解 剖针、载玻片、盖玻片、 滤纸、绘图纸 三、仪器与材料 ( 1 )取果蝇三龄幼虫置于载玻片上,由于果蝇的唾腺位于 幼虫体前 1/3-1/4 处,所以左手持镊子按压住虫体后端三 分之一的部位,固定幼虫,右手持解剖针扎住幼虫头部 口器部位,适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。 四、实验程序 果蝇三龄幼虫解剖图 Salivary gland :唾腺 Gonad: 性腺 Ganglion: 神经节 Trachea: 气管 Ovary :卵巢 Intestine :肠 挑取果蝇唾腺的过程 唾腺的位置及形态特征 ( 2 )滴加一滴醋酸洋红,在显微镜下( 4 倍镜)去除唾腺周 围的脂肪等其他组织部分。唾腺是一对透明的棒状腺体, 外有白色的脂肪组织(不透明)。去除幼虫其它组织部分, 并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。 分离出来的果蝇唾腺 位置:在幼虫体前约 1/3 处; 形状:形如一对香蕉,上 小上大。一边常附着带状 的不透明的脂肪。 颜色:半透明如玻璃,略 带白色,比周围组织透明; 细胞特征:唾腺上的细胞 较大,轮廓清晰,用低倍 镜即可清楚看到。 唾腺组织 不同人操作得到的唾腺组织可能不一样 放大的唾腺组织 放大的唾腺组织 放大的唾腺组织 ( 3 )盖上盖玻片,用刀片支起盖玻片一角,按住盖玻片另 一边,用解剖针轻轻敲打盖玻片,去掉刀片,稍加热后覆 上滤纸垂直压片。 ( 4 )观察,先在 10 倍镜下观察找到染色体后,再换高倍镜 下观察,比较各染色体的横向纹带、带宽大小、带纹排列 顺序,以及由着丝点纠集组成的染色体中心。
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