FoxO1促进ATGL依赖的脂解作用改善棕榈酸诱导的HepG2肝细胞脂质蓄积的研究.pdf

目 录 中文摘要I 英文摘要IIIII 常用缩写词中英文对照表V 前 言1 1 材料与方法3 1.1 实验材料3 1.2 实验方法6 2 结 果13 2.1 棕榈酸诱导HepG2 细胞脂质蓄积并抑制其脂肪分解13 2.2 棕榈酸抑制HepG2 细胞中FoxO1、ATGL 和CGI-58 的表达并增加PPARγ 和G0S2 的表达13 2.3FoxO1 过表达诱导棕榈酸处理HepG2 细胞ATGL 和CGI-58 表达并抑制 PPARγ和G0S2表达15 2.4FoxO1 过表达抑制棕榈酸酸处理HepG2 细胞脂质蓄积并促进其脂肪分解...16 2.5G0S2siRNA 干扰抑制棕榈酸处理HepG2 细胞脂质蓄积并促进其脂肪分解.17 3 讨 论20 4 结 论22 参考文献23 综 述29 致 谢42 个人简介45 山西医科大学硕士学位论文 FoxO1促进ATGL 依赖的脂解作用改善棕榈酸诱导的HepG2 肝细胞脂质蓄积的研究 摘 要 目的： 肥胖与非酒精性脂肪肝的发生发展密切相关。肥胖时升高的血清棕榈酸是诱导 肝脏脂质蓄积的重要原因。人叉头框蛋白O1（FoxO1）是FoxO 转录因子家族的成 员，可诱导肝脏脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）表达并抑制G0/G1 开关基因2（G0S2） 表达。然而，既往研究也显示了FoxO1 在肝脏脂质蓄积中具有相反作用。本研究采 用棕榈酸处理HepG2 肝细胞，以期阐明FoxO1 在棕榈酸诱导肝细胞脂质蓄积中的 作用及其分子机制。 方法： 分别以棕榈酸、棕榈酸＋pReceiver-M98-FoxO1 及棕榈酸＋G0S2siRNA 处理 HepG2 肝细胞。采用油红O 染色检测细胞内脂质蓄积，通过检测细胞培养液甘油含 量评价脂解活性。采用实时定量PCR 和蛋白质印迹检测相关基因表达。 结果： 棕榈酸显著诱导HepG2 细胞脂质蓄积并抑制其脂肪分解。棕榈酸显著抑制 FoxO1、ATGL 及比较基因识别-58（CGI-58）表达，同时诱导过氧化物酶体增殖物 激活受体γ （PPARγ）及其靶基因G0S2表达。FoxO1 过表达显著增加棕榈酸抑制的 ATGL 和CGI-58表达，同时减少棕榈酸诱导的PPARγ和G0S2表达。FoxO1 过表达 显著抑制棕榈酸处理HepG2细胞脂质蓄积并促进其脂肪分解。G0S2siRNA干扰显著 抑制棕榈酸处理HepG2细胞脂质蓄积并促进其脂肪分解，但G0S2siRNA干扰不影 响FoxO1、PPARγ、ATGL 和CGI-58表达。 I 山西医科大学硕士学位论文 结论： 棕榈酸可抑制肝细胞FoxO1、ATGL，CGI-58表达并增加G0S2表达，而FoxO1 过表达可增加棕榈酸处理肝细胞ATGL，CGI-58表达并抑制G0S2表达，表明FoxO1 可通过活化ATGL 依赖的脂肪分解改善棕榈酸诱导的肝脏脂质蓄积。 关键词：非酒精性脂肪性肝病；脂肪分解；人叉头框蛋白O1；脂肪甘油三酯脂肪 酶；G0/G1开关基因2 II 山西医科大学硕士学位论文 FoxO1promotesATGL-dependentlipolysistoimprove palmitate-inducedHepG2hepatocytelipidaccumulation Abstract Objective: Obesityiscloselyassociatedwithnon-alcoholicfattyliverdisease （NAFLD）,and elevated serum palmitate is the link between obesity and excessiv