乳果糖对急性肝损伤大鼠肠道菌群及血清代谢物影响的实验研究.pdfVIP

目 录 中文摘要I 英文摘要V 常用缩写词中英文对照表X 前 言1 研究论文 乳果糖对急性肝损伤大鼠肠道菌群及血清代谢物影响的实验研究2 1 材料与方法2 1.1实验材料2 1.2实验方法2 1.3标本采集与处理3 1.4标本检测方法4 1.5统计学分析5 2 结 果6 3 讨 论17 4 结 论26 参考文献27 综 述31 致 谢43 个人简历44 山西医科大学硕士学位论文 乳果糖对急性肝损伤大鼠肠道菌群及血清代谢物影响的实验 研究 摘 要 目的： 本实验旨在通过硫代乙酰胺 （TAA）建造急性肝损伤大鼠模型，观察该模型的 肠道菌群及血清代谢物的变化，进而探讨乳果糖对模型上述观察指标的影响作用， 以期为急性肝损伤的临床治疗提供新思路。 方法： 将36只健康清洁级雄性SD大鼠适应性喂养1周后随机分为3组：正常对照组 （DZ 组）、模型组 （ALI 组）和乳果糖干预组 （RG 组），每组12只，均给予普 通饲料喂养，RG 组按7ml/kg予乳果糖温开水稀释后每天灌胃一次，DZ组和ALI组 则给予等量的生理盐水；实验全程给予乳果糖干预,共7天。实验第6天和第7天， 对RG 组和ALI组的大鼠腹腔内注射TAA （200 mg/kg），制备急性肝损伤模型，DZ 组则以2ml生理盐水代之，实验第8天，对隔夜禁食的各组大鼠在麻醉状态下于腹 主动脉取血，分别用于血ALT、TBIL、ALB、D-乳酸及血清代谢物的检测；取血结束 后，切取肝脏组织标本进行HE染色，观察其病理学改变；无菌操作收取大鼠新鲜 粪便，通过16S rDNA 测序技术研究肠道菌群结构变化；最后利用液质联用技术 （LC-MS）对各组大鼠血清代谢物进行代谢组学分析，鉴定出各组间的差异代谢物。 结果： 1. 大鼠肝功能结果：ALI组对比DZ组：ALT、TBIL水平均明显升高，差异有统计 学意义(P＜0.05)；RG 组对比ALI组：ALT、TBIL水平均显著降低(P＜0.05)；RG 组 上述指标对比 Nor 组亦有差异 （P＜0.05）；ALI组对比DZ组：ALB 明显降低(P＜ V 山西医科大学硕士学位论文 0.05)，RG对比ALI组：ALB升高，但无统计学差异(P＞0.05)，RG组对比DZ组亦 有统计学差异 （P＜0.05）。 2. 大鼠肠道屏障功能变化：ALI组对比Nor组：血清D-乳酸显著升高(P＜0.05)； RG 组对比ALI组：血清 D-乳酸显著降低(P＜0.05)；RG 组与DZ组之间血清D-乳 酸含量差异无统计学意义(P＞0.05)。 3. 肝脏病理结果：DZ组：肝小叶结构完整，中央静脉未见淤血，肝索径向排列于 中央静脉周围，肝窦结构清晰。ALI 组：肝小叶结构完整，中央静脉可见瘀血，肝 小叶可见点状坏死、灶状坏死及桥接坏死，门管区存在大量炎性细胞浸润；RG 组： 肝细胞可见气球样变，部分肝小叶周围存在点状坏死，未见灶状坏死，炎性细胞浸 润程度较轻。三组均未见肝组织纤维化及明显的肝细胞再生。 4. 回肠组织HE染色：DZ组：回肠黏膜结构清晰完整，绒毛排列紧密且规整；ALI 组：回肠粘膜变得萎缩增粗，绒毛排列稀疏且紊乱，其中可见部分细胞发生脱落， 伴有炎性细胞浸润。RG 组对比ALI组：回肠粘膜结构基本完整，绒毛排列略稀疏， 绒毛轻度水肿。 5. 回肠组织扫描电镜：DZ 组：回肠绒毛形态宽阔，排列方式紧凑而规律。ALI 组：回肠绒毛扁平，排列疏松而不规整，可见部分倒伏、破损。RG 组对比ALI组： 回肠绒毛形态较丰满，排列相对致密、规整。 6. 粪便菌群 16S 高通量测序结果 6.1 实验大鼠肠道菌群多样性分析 Alpha多样性指数分析结果：ALI组对比DZ组：ace指数降低，差异有统计学 意义 （P＜0.05）；RG对比ALI组：ace指数升高，但差异无统计学意义 （P＞0.05）， 提示急性肝损伤大鼠肠道微生物丰富度降低，而乳果糖可使急性肝损伤大鼠肠道微 生物丰富度趋于恢复。 ALI组对比DZ组：Sim