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蛋白质泛素化修饰技术路线.ppt

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安必奇生物科技有限公司 wWw, abaca·bial0gy,c 蛋白质翻译后修饰 蛋白泛素化修饰 01)蛋白质翻译后修饰介绍 CON02 蛋白质泛素化修饰 TENTS 03)技术路线 04)总结展里 1 蛋白质翻译后修饰介绍 蛋白质籠译后修然(PM)是指蛋白质在谗中或寵译后经历的一个共个加工过,即通过1个或几个氨基 酸残基加上修饰基或通过蛋白质水解剪去基洲改变蛋白质的性贡 One Gene More proteins. 即柳聊自(PTM)是指蛋白质在 卵郎印翻泽中或翻译后经历的 解一个共价加工过程,即 留织通过个或几个氨基酸 哪啊即 级的残基加修饰基团或通 绑过蛋白质水解剪去基团 Proteome 而改变蛋白质的性质。 225109anes 10000 transcript Post tmnsletioral 100 C00 proteins medic atons http:/wwewabace-biolosy.cor Why post-translational Modification Of Proteins 翻译后修饰Pos translational modification, PTM)XE 指对翻译后的蛋白质进行共价加工 Cell lines or tissue Protein mixture Peptide mixture Enrichment 的过程。它通过在一个或多个氨基 酸残基加上修饰基团,可以改变蛋 白质的物理、化学性质,进而影响 蛋白质的空间构象和活性状态、亚 ID2D SDS- PAGE eptide mixture LC-MS/MS 细胞定位、折叠及其稳定性以及蛋 白质-蛋白质相互作用。蛋白质翻 译后修饰的丰度变化在生命活动研 究中具有重大意义,异常的翻译后 Database Search 饰会导致多种疾病的发生 Protein and PTm identified Types Post-translational Modifiction Of Proteins 从定义的角度,可以如下理解蛋白质翻译后修饰 L.对某氨基酸的修饰包括共价连接简单的官能团(如乙駪基或磷酸基)和引入一些复结构,如脂 2将已经结束翻译的转录本产妆切割成成熟的形式,如信号肽或洋性肽的加工等。 基酸的交联,如丝氨酸和酪氪酸。 可以说,蛋白质组中任蛋白质都能在翻译时或翻译后进行修饰,不同类型的修饰都会影响蛋白质 的电荷状态、疏水性、构象和(或)稳定性,终影响其功能。 诸多实例表明蛋白质的修饰都采取一种可逆模式“开”或“关”的状态进行,或者调节蛋白质的 功能,或者作为真实的分子开关。 ●目前已发现30多种不同的翻译后修饰,主要形式包括磷酸化、糖基化、乙酰化、泛素化、羧基 化、核糖基化以及二硫键的配对“等。 Types post translational Modification Of Proteins phosphorylation Ubiquitination Methylation Acetylation Sulfation nidation Hydroxylation PTMS Sumoylation Nitration Formyl Glycosylation Palmitoylation ubiquitination 2 蛋白质泛素化修饰 直以‰人们都忽祝了蛋白质水解参与的细胞功能的词控。泛素和与其相关的蛋白水解的发现,整 个科学界带采了巨大的影响 Ubiquitination 泛素广泛存在于真核生物中,是由76个氨基酸组成的多肽,高度保守。(不容易发生突变,它在不 同的物种中的序列是高度一致的,因为如果这些序列发生突变的话,功能就会受到影响,生命体就不能 存活或者被自然选择就淘汰掉了,所以它在生物的进化过程中是很稳定的。比如人类和酵母的泛素只存 在三个残基的区别。) 泛素化修饰是指泛素分子在一系列特殊的酶作用下,将细胞内的蛋白质分类,从中选出靶蛋白分 并对靶蛋白进行特异性修饰的过程。这些特持殊的酶包括泛素溵活酶,结合酾、连结酶和降解酶等。泛素 化在蛋白质的定位、代谢、功能、调节和降解中都起着十分重要的作用。同时,它也参与了细胞周期、 增殖、凋亡、分化、转移、基因表达、转录调节、信号传递、损伤修复、炎症免疫等几乎一切生命活动 的调控。泛素化与肿瘤、心血管等疾病的发病密切相关。因此,作为近年来生物化学研究的个重大成 果,它已然成为研究、开发新药物的新点, Ubiquitination 首先在ATP(红色所示)供能的情况下酶E1(蛋白质编号1r4m)粘 附在泛素分子尾部(淡黄色所示)的Cys残基上(绿色所示,注意在这 个结构中,Cys突变为Ala)激活泛素,接着,E1将激活的泛素分子转移 到E2酶上(蛋

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