蛋白质稳定性和稳定化.ppt

第四章蛋白质的稳定性和稳定化  第一节:蛋白质的稳定性 蛋白质稳定性的分子原因 蛋白质的稳定性:蛋白质抵抗各种 因素的影响,保持其生物活力的能 力  维持蛋白质结构稳定的主要因素: 1.金属离子、底物、辅因子和其他相对 低分子质量配体的结合作用 金属离子由于结合到多肽链的不稳定 部分(特别是弯曲处),因而可以显著增 加蛋自质的稳定性。当酶与底物、辅因 和其他低相对分子质量配体相互作用时, 也会看到蛋白质稳定性的增加。  2蛋白质-蛋白质和蛋白质-脂的作用 由于蛋白质分子表面上既有疏水簇,也 有极性和带电基团。从热力学上看,疏水 簇与水的接触对蛋白质稳定性是不利的。 所以当蛋白质形成复合物时,脂分子或 蛋白质分子稳定到疏水簇上,因而防止疏 水簇与溶剂的接触,屏蔽了蛋白质表面的  3.盐桥和氢键 盐桥:当一个氨基酸的氨基和与它空间相 邻的另一个氨基酸的羧基互相靠近时,形 成盐桥。 CO○.…H3N 蛋白质中盐桥的数目较少,但对蛋白 质的稳定性作用很显著。  氢键:是通过氢原子参与成键的特殊形式 的化学键。 个电负性较强的原子与氢键合后, 继续与另一个电负性较强的原子键合 氢键能维持二级结构(如α螺旋,β-片 层,β-转角等)。但是氢键对蛋白质稳定 性的重要性不应估计过高。  4.二硫键 二硫键:即S-s键,是2个巯基被氧化而形 成的-SS-形式的硫原子间的共价键。 链内二硫键和链间二硫键: A EE Gly-lle-Val-Clu-Glu-Cys-Cys-Ala-Ser-Val-Cys-Ser-Leu-Tyr-Gin-Leu-Glu-Asn-TyT-Cys-Asn 21 B链 Phe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys-Glv-Ser-His-Leu-Val-Glu-Ala-Leu-Tyr-Leu-Val-Cys-Gly-Clu-Arg- Gly-Phe-Phe-Tyr-Thr-Pro-Lys-Ala 31 图1胰岛素蛋白分子的链内二硫键和链间二硫键 Cys是半胱氨酸的英文缩写  由于交联即蛋白质中形成二硫键,伸 展蛋白质的熵急剧降低,从而增加蛋白质 的稳定性 与此类似,用双功能试剂实现分子内交 联,也能使蛋白质构象稳定化。  日常生活中的烫发和发型保持,主要原理是操 纵毛发角蛋白二硫键的还原和再氧化,即二硫键的 断开和重新键合。 烫发前 烫发后 SHSH SH 巯基 还原剂 SHSH SH氧化剂 SH SH SH SHSH 图2二硫键的还原和再氧化是烫发时发型改变的基础 代表肽链,S-S表示二硫键,SH表示巯基  5.对氧化修饰敏感的氨基酸含量较低 蛋白质中一些结构比较重要的氨基酸残 基(如活性部位的氨基酸)的氧化作用是 蛋白质失活的重要原因。因此要减少这类 对氧化修饰敏感的氨基酸含量,从而提高 蛋白质的稳定性。