中药综合检验技术 紫外-可见分光光度法 分析化学实验722s可见分光度计使用操作.pptVIP

山东中医药高等专科学校 Shandong College Of Traditional Chinese Medicine 无机与分析技术 基础化学教研室 722s可见分光度计使用操作 一、实验目的 1. 学会使用分光光度计 2. 能绘制吸收曲线和标准曲线 3. 学会测定有色物质的含量和吸光系数 二、实验原理 三、 仪器和试剂 仪器：722s可见分光光度计、比色皿、烧杯、滤纸、坐标纸等。 试剂： 高锰酸钾标准溶液、 高锰酸钾系列浓度溶液（5,10,15,20,25 μg·ml-1）、 高锰酸钾待测溶液Cx μg·ml-1、蒸馏水等。 四、 操作步骤 1.打开仪器，预热20min 2.将蒸馏水做空白样品置于光路中，设定波长λ=420 nm，调模式键选择透光率T，按100%T,模式键选择吸光度A显示0.000，将KMnO4标准溶液置于光路中，等读数稳定后，记录吸光度A值。 3.按2中方法，依次设定波长λ=440,460,480,500,520,525,530,540,560,580,600 nm，记录对应KMnO4标准溶液吸光度A值，并绘制A-λ吸收曲线。 四、 操作步骤 4.在最大吸收波长525 nm处，将蒸馏水做空白样品置于光路中，设定波长λ=420 nm，调模式键选择透光率T，按100%T,模式键选择吸光度A显示0.000，将5 μg·ml-1KMnO4溶液置于光路中，等读数稳定后，记录吸光度A值。 5.按4中方法依次测定浓度为10,15,20,25 μg·ml-1KMnO4溶液的吸光度A值，并绘制A-C标准工作曲线。 6.按4中方法测定浓度Cx μg·ml-1KMnO4溶液的吸光度A值，并计算Cx。 四、 操作步骤 7．结束工作 测定完毕，洗净比色皿，晾干后装入比色皿盒中。仪器还原，并关闭仪器电源。 数据处理 λ/nm 420 440 460 480 500 520 525 530 540 560 580 600 A1 A2 浓度/吸光度 C1 C2 C3 C4 C5 Cx A1 A2 数据处理 * 山东中医药高等专科学校 Shandong College Of Traditional Chinese Medicine *