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要先将玻璃板撬掉才可剥胶，撬的时候动作要轻，要在两个边上轻轻的反复撬。撬一会儿玻璃板便开始松动，直到撬去玻板。（撬时一定要小心，玻板很易裂。） * 将浓缩胶（浓缩胶影响操作）和分离胶上不用的部分切去 * 在加有转移液的搪瓷盘里放入转膜用的夹子、两块海绵垫、一支玻棒、滤纸和浸过的膜，将夹子打开使白的一面保持水平。在上面垫一张海绵垫，用玻棒来回擀几遍以擀走里面的气泡 。 * 在垫子上垫三层滤纸（可三张纸先叠在一起在垫于垫子上），一手固定滤纸一手用玻棒擀去其中的气泡。依次加膜、加胶，再在膜上盖3张滤纸并除去气泡。 * 最后盖上另一个海绵垫，擀几下就可合起夹子。整个操作在转移液中进行，要不断的擀去气泡。膜两边的滤纸不能相互接触，接触后会发生短路。转移液含甲醇，操作时要戴手套，实验室要开门以使空气流通。 * 合起夹子 * 将夹子放入转移槽中，要使夹的黑面对槽的黑面，夹的白面对槽的红面。 * 电转移时会产热，在槽的一边放一块冰来降温。 * 加上转移缓冲液 * 盖上盖子,放入乘有水的水槽中,水槽中加冰袋 * 电转移200mA 2-3h后，打开盖子，取出夹子 * 打开夹子，取出膜，如果所用marker是预染marker,可见marker已经转移到膜上,如果不是预染marker，可以把膜转完后将膜用1×丽春红染液染5min，于脱色摇床上摇，然后用水冲洗掉没染上的染液就可看到膜上的蛋白。 将膜晾干备用。 * 将膜用TBS从下向上浸湿后，移至含有封闭液的平皿中 * 室温下脱色摇床上摇动封闭1h。 * 按所需稀释浓度滴加一抗（直接加在封闭液里）4℃ 过夜或37℃ 3h。 * 第二天取出膜，用TBST洗三次每次10min，然后加入TBS液中，按稀释浓度滴加二抗。室温孵育1h,再用TBST洗三次每次10min。最后DAB显色或者化学发光法显影。 * WESTERN BLOTTING 过程图解 * 图中绿色的是夹玻璃片的架子 *
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